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  • 發布時間:2022-11-11 13:59 原文鏈接: 關于轉導的基本應用介紹

      應用轉導是細菌的遺傳學研究中的一種常用研究手段。它可以用來在細菌間轉移基因,進行互補測驗,進行基因定位,特別是通過共轉導方法進行基因的精細結構分析。在遺傳工程中可以把所要克隆的基因通過重組DNA技術插入到λ噬菌體的DNA中,然后通過離體包裝方法把它用噬菌體外殼蛋白包裝起來,再去感染寄主細胞以制備基因文庫。

      轉導實驗中常用的是 λ 噬菌體,它能整合在大腸桿菌染色體 DNA 上的半乳糖基因 (gal.17 分鐘處 ) 與生物素基因 (bio.18 分鐘處 ) 之間,因此,它能轉導 gal 基因又能轉導 bio 基固。選用溶源性的 E.coliK12 ( λ) gal + 為供體菌。由于在此供體菌中 λ噬菌體 與 gal + 基因 緊密連鎖,因此,當此供體菌受紫外線照射后產生裂解反應,噬菌體被誘發釋放,以一定的比例形成帶有 gal 基因的轉導噬菌體。當讓這種轉導噬菌體與受體菌 E.coliK12S gal  -混合接觸時,帶有供體菌 gal + 基因的轉導噬菌體能以一定的頻率整合到受體菌的染色體 DNA ,而使不能利用半乳糖的 gal  -受體菌轉變成了能利用半乳糖的 gal + 細菌。

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