取國家批準的重組酵母乙型肝炎疫苗的原始菌種，經一代擴增，制成生產菌種，逐級擴增后接種于發酵罐，在適宜溫度和時間內進行三級發酵，收集細胞，經破碎，吸附粗提，疏水色譜法精提乙型肝炎表面抗原，再經硫氰酸鹽處理，除菌濾過，甲醛滅活，氫氧化鋁吸附等，加入硫柳汞作為防腐劑。
取國家批準的重組CHO乙型肝炎疫苗的細胞株，用靜置培養或旋轉法培養細胞，當乙型肝炎表面抗原的分泌量達到每1.0mg/L時，收獲培養液，經硫酸銨鹽析，2～3次密度梯度離心和色譜法純化后，再經濃縮，除菌濾過，甲醛滅活，氫氧化鋁吸附等，加硫柳汞作為防腐劑，分裝制成。