試驗法有劃痕、斑貼、滴眼、皮內注射等法，以皮內注射法（皮試）為常用。皮試液是由青霉素G鈉溶于等滲氯化鈉注射液（500單位/ml），以無菌操作法制成，4℃下保存可用1周，室溫則只限當日應用。將皮試液0.02～0.05ml注于肘內側皮下，等待20分鐘觀察結果，呈陰性反應時始可用藥。有時雖皮試局部呈陰性反應，但患者有胸悶、頭暈、哮喘、皮膚發癢等癥狀出現，也不應給予藥物。
