冷酒精沉淀法抗體純化

1、 血清加3倍體積的蒸餾水，調節 pH至7.7(±)冷卻到0℃。在激烈攪拌的條件下，加預冷的酒精（-20℃）到最終濃度為20%，保持在-5℃。產生的沉淀（a），含有大多數種類的免疫球蛋白。
 
2、 沉淀a懸浮于25倍體積的0.15～20mol/l NaCl溶液（冷）中，加有0.05mol/l醋酸調節 pH到5.1，產生的沉淀（b），包括大部分的IgA和IgM，IgG留在上清液內。

3、調節

上清液的pH到7.4，加冷酒精（-20℃～-30℃）到最終濃度為25%，維持在-5℃。所得到的沉淀（c）含有90%～98% IgG。不同動物，IgG分離的條件和產量略有不同。見下表。

4、從沉淀（b）可按下述方法進一步分離出IgA和IgM的混合物：將沉淀（b）懸浮在0℃ 水中，調節 pH到5.1，離心去除不溶的蛋白。調節 上清液離子強度到0.01～0.0075,pH5.5。然后加冷酒精到最終濃度為10%，保持在 –2℃或-3℃低溫，所得的沉淀（b-b）主要含IgA和IgM。