凋亡蛋白質的原核表達與純化

摘要：目的構建來自雞貧血病毒（CAV，chicken anaemia virus）VP3 基因編碼的凋亡蛋白質表達載體，在大腸桿菌中進行表達，并研究凋亡蛋白質的純化和穩定性。方法PCR（polymerase chain reaction）獲得正確編碼VP3 基因片斷，構建表達質粒pET-28a-VP3 在E. coli BL21(DE3)中表達。用Ni-NTA 柱純化可溶性目標蛋白質，并研究不同條件下凋亡蛋白質的穩定性。結果目標蛋白質在大腸桿菌中獲得表達，純化后蛋白質純度高于90 %，卡拉膠可明顯提高重組蛋白質可溶狀態下的穩定性。結論成功獲得高純度VP3 可溶性蛋白質，增加了目標產物的穩定性，為進一步研究該蛋白質的臨床應用奠定基礎。