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  • 發布時間:2022-11-10 08:25 原文鏈接: 凝膠電泳的顯色效果

    觀察凝膠中DNA的最簡便、最常用的方法就是利用熒光染料溴化乙錠進行染色。溴化乙錠是一種具有扁平分子的核酸染料,在高離子強度下,大約每2.5個堿基插入一個溴化乙錠分子。在DNA溴化乙錠復合物中,DNA吸收254nm處的紫外輻射并傳遞給染料,而結合的染料分子本身吸收302nm和399nm的光輻射,因此吸收的能量可在可見光譜紅橙區的590nm處重新發射出來。

    因此對核酸分子染色之后,將電泳標本放置在紫外光下觀察,便可以十分敏感而方便地檢測出凝膠介質中DNA的譜帶部位,即使每條DNA帶中僅含有0.05g的微量DNA,也可以被清晰地顯現出來。在適當的染色條件下,熒光的強度是同DNA片段的大小或數量成正比的。在包含有幾種DNA片段的電泳譜帶中,每一條帶的熒光強度是隨著從最大的DNA片段到最小的DNA片段方向逐漸降低的。

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