實驗方法原理 刀豆球蛋白屬凝集素:凝集素(Lectin)是一類可結合特定糖基的蛋白質。每個凝集素分子有兩個以上的結合位點。癌細胞和轉化細胞所需凝集素的濃度比正常細胞低,這可能與細胞表面凝集素受體分布有關;正常細胞分散,癌細胞較集中,結合性增強。
實驗材料 細胞
試劑、試劑盒 PBSConA
儀器、耗材 振蕩器玻璃板
實驗步驟
1. 細胞懸液制備
用pH7.4的磷酸緩沖液(PBS)制成每毫升含10×104 個細胞的懸液;
2. ConA PBS
用PBS配制成0.59 %的ConA液;
3. 凝集試驗
向若干凹孔玻璃板凹中加細胞懸液,每凹加0.1 ml,再分別加入ConAPBS 0.1 ml,使ConA的最終濃度依次為:100、50、25、12.5 和零(對照) μg;
4. 置微型振蕩器上振蕩5~10 分鐘后,觀察凝集現象。
5. 結果
如細胞懸液變成絮狀物,說明已發生凝集;細胞凝集反應是測試細胞生物性狀的一個標志。