分光光度計測量條件的選擇

　　1 參比溶液和溶劑的選擇

　　分光光度計的測量實際上是以通過參比池的光強度作為入射光強度來測定試樣的吸光度，先調節儀器使透過參比池溶液的吸光度為零，然后讓同一束光通過樣品，使得吸光度比較真實地反映待測物質的濃度，所以參比溶液的選擇非常重要。如果僅有待測物質與顯色劑的反應產物有吸收，可用純溶劑或蒸餾水作參比溶液。如果顯色劑有顏色，并在測定波長下有吸收，則用顯色劑溶液作參比溶液，所加人顯色劑及其它試劑的量，與試樣中的加入量應一致。如果樣品中其它組分本身的顏色對測定有干擾，而所用顯色劑沒顏色，則用不加顯色劑的樣品溶液作參比液。

　　正確選擇合適的溶劑，對提高分析的準確度起重要作用。為減小溶劑中雜質的影響，應選擇高純度的溶劑；溶劑應不與待測物質發生化學反應；待測物在溶劑中要有一定的溶解度；在測定的波長范圍內，溶劑本身沒有吸收，注意常用溶劑的最短可用波長；當用揮發性大的溶劑時，測量過程中吸收池應加蓋。

　　2 測試波長的選擇

　　當用分光光度計對溶液進行測定時，首先需要選擇合適的測量波長。選擇的依據是該被測溶液的吸收曲線。在一般情況下，我們總是選擇最大吸收波長作為測量波長，這樣可以提高靈敏度。而在有些情況下最大吸收峰很尖銳、吸收過大或附近有干擾存在，就不能選最大吸收波長，而必須在保證有一定靈敏度的情況下，選擇吸收曲線中的其它波長進行測定(曲線較平坦處對應的波長)，以消除干擾。繪制吸收曲線是正確選擇波長的有效手段和方法。