化學鍵合相色譜儀是在液液分配色譜儀基礎上發展起來的。液液分配色譜儀雖有較好的分離效果,但由于固定液是以機械的方法吸附在載體表面上,固定液流失嚴重,使柱效和分離選擇性下降,柱使用壽命短。流失的固定液會給基線帶來大的噪聲而降低檢測器的靈敏度,同時也會污染分離后的組分。為了解決這個問題,將各種不同的有機基團通過化學反應以共價鍵連接到色譜柱載體表面上,形成均一、牢固的單分子薄層而制成化學鍵合固定相,進而發展成化學鍵合相色譜儀。
化學鍵合固定相對各種極性溶劑都有良好的化學穩定性和熱穩定性。由它制備的色譜柱柱效高,使用壽命長,重現性好,幾乎對各種類型的有機化合物都呈現良好的選擇性,特別適合寬范圍k值的樣品的分離,并可用于梯度洗脫。至今化學鍵合相色譜儀已逐漸取代液液分配色譜儀,并獲得日益廣泛的應用,在高效液相色譜儀中占有很重要的地位。
根據化學鍵合固定相與流動相相對極性的強弱,化學鍵合相色譜儀可分為正相鍵合相色譜儀和反相鍵合相色譜儀。在正相鍵合相色譜儀中,化學鍵合固定相的極性大于流動相的極性,適合脂溶性、水溶性的極性和強極性化合物的分離。在反相鍵合相色譜儀中,化學鍵合固定相的極性小于流動相的極性,適合非極性、極性和離子型化合物的分離,其應用范圍比正相鍵合相色譜儀更廣泛,約70%~80%的分離分析工作是由反相鍵合相色譜儀完成的。化學鍵合固定相的研制成功和應用是高效液相色譜儀發展的一個里程碑。
一.原理“化學鍵合相色譜法”——采用化學鍵合相作固定相的液相色譜法。化學鍵合相是利用化學反應通過共價鍵將有機分子鍵合在載體(硅膠)表面,形成均一、牢固的單分子薄層而構成的固定相。其分離機理為吸附和分配......
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