（1）溶血素滴定：按表1成分、次序、劑量加入各管進行滴定。
溶血素單位：即能完全溶解紅細胞的溶血素最高稀釋度，按表1假定結果，1∶2400稀釋度（0.1ml）的溶血素為1個單位。如實驗時應用2個單位，即1∶l200稀釋度（0.1ml）的溶血素溶液。
（2）補體滴定：將補體稀釋成1∶30。按表2成分、次序、劑量加入各管中作滴定，整個試驗過程中補體應放在冰水盒中，防止活性下降。
補體單位：即能發生完全溶血現象的最小補體量。按表2假定結果，1∶30補體0.12ml內含1個單位，則0.24ml含有2個單位。為使0.2ml中含有2個單位，可按下法計算稀釋：
補體作1∶25稀釋后，每0.2ml中含有補體2個單位。
（3）抗原滴定：
①將64支試管排方陣，即8行與8排。
②先作二倍稀釋已滅活（56℃30min）的免疫血清，于第一排1～8各管中加1∶2稀釋血清0.1ml，將1∶4稀釋血清加至第二排1～8管中，如此二倍遞增稀釋血清加到第七排。第八排不加血清，以0.1ml鹽水代替，作為抗原對照。
③同上法稀釋抗原，第一行1～8各管中加1∶2稀釋抗原0.1ml；第二行中1～8各管中加1∶4。稀釋抗原0.1ml，如此，二倍稀釋抗原加到第七行，第八行不加抗原，以0.1ml鹽水代替，作為血清對照。
④在各對照管中補充鹽水0.1ml。
⑤然后，再于每管中加入2U補體0.2ml，放置4℃冰箱16～18h，次日置37℃水浴箱中30min，各管中加入1.25%綿羊紅細胞及溶血素（2U）各0.lml，再放置37℃水浴箱中30min。
⑥觀察結果：如“4＋”表示補體完全被檢驗系統所固定，呈現全不溶血；“－”表示補體完全未被檢驗系統固定，呈現完全溶血；在二者之間不同程度
者則以“3＋”、“2＋”、“＋”、“±”表示之。
抗原單位：即能與最高稀釋倍數的血清呈“3＋”反應的抗原最高稀釋倍數即為1個抗原單位。如表3所示，1∶8。試驗時用2個單位，即1∶4。
（4）正式試驗：
①排列試管12支，前8支管加入不同稀釋度血清，檢查抗體的有無及效價，后4支管作為對照，另取4支管作補體對照。
②按表4內容加入各種材料。