1)檢查取樣室內門并關緊之。
2)打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關上外們。
3)取樣室充氮置換三次過程，先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停，然后打開取樣室氧氣閥進氣，使指針回復零位，關掉閥。取樣室充氮置換三次過程結束。
4)如選定真空度較低就需要增加置換的次數。
5)取樣室外門開啟、關緊后，再抽低真空度100毫米汞柱(13Kpa)檢驗。
6)厭氧培養箱需要長期連續使用的條件
(1)每天在操作室內放入美蘭指示條觀察，如不能正常就必須重新換氣。
(2)要長期連續輸入微量的混合氣體。使補進的氮氣能和微量的氮結合通過催化吸收，保證了室內厭氧狀態，補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。
(3).連續培養運行，更換一次除氧劑和干燥劑。(換下的除氧劑和干燥劑可放在200℃干燥箱內，干燥2-3小時可使其復原)
7)接種棒滅菌器的應用：
(1)隨時用鎳烙電熱絲使電極短路而變赤熱以進行殺菌(接種棒)。
(2)熔蠟處可直接放上試管封蠟口旋轉熔蠟。
8)操作室理的培養箱理的培養箱內的溫度可任意選擇和控制。