原代細胞骨架的染色方法！

一、微絲的顯示方法步驟：
1、用PBS液漂洗蓋片培養的原代細胞3次，每次30s；
2、用2%的甲醛/PBS液固定原代細胞3min；
3、用0.5%的PBS處理3次，每次10min；
4、PBS漂洗3次；
5、用羅丹明（rhodamine）標記的鬼筆環肽（phalloidin）（1：10）室溫中反應15min；
6、PBS漂洗3次；
7、60%甘油+熒光防淬劑封片；
8、熒光顯微鏡觀察；
 
二、微管的顯示方法：
1、用PBS液漂洗蓋玻片的原代細胞3次，每次30s；
2、在室溫中用3%甲醛/PBS固定20min；
3、用PBS液再漂洗3次，每次1min，后用濾紙吸干多余的PBS液；
4、投入冷丙酮中（-10—-20℃）7min；
5、用PBS漂洗3次，每次1min，后用濾紙吸干多余的PBS液；
6、向直徑6cm的干凈碟皿*滴一滴濃度為0.1—0.2mg/ml的一級抗微管蛋白抗體，令小蓋片細胞面向下扣在抗體液上，覆以皿蓋，于37℃溫箱中放置45min—1h；
7、向碟皿內勻速緩慢滴加PBS，令蓋片浮起在液面，用鑷子夾出，按步驟3處理；
8、向干凈碟皿*滴一滴濃度為0.1—0.2mg/ml的熒光標記的二抗，其后操作按步驟6進行；
9、按步驟7和3操作；
10、滴pH8.5的90%的甘油/PBS少許于載玻片上，把小蓋片的原代細胞面覆在大蓋片上；
11、將蓋片置于熒光顯微鏡下觀察；