1． Bradford 工作液
95%乙醇 25ml 先用乙醇溶解考馬斯亮蘭G250，溶解完后再加磷
85%磷酸 52ml 酸，最后超純水定容至500ml。過濾后置于棕色瓶
考馬斯亮蘭G250 0.035g 外加油皮紙保存（Bradford不穩定，一周內有效）
2． 裂解液
尿素 8M
硫脲 2M
CHAPS 4%
DTT 60 mM
Tris—base 40 mM（如果有條件可以添加PMSF 0.5mM和5%的Pharmalate）
3. 水化液儲液
尿素 8M
硫脲 2M
CHAPS 4%
Tris—base 40 mM
4. 分離膠buffer (pH8.8) 250ml
SDS 0.4% 1g
Tris—HCl 1.5M 45.4275g
5. 濃縮膠buffer (pH6.8) 100ml
SDS 0.4% 0.4g
Tris—HCl 0.5M 6.07g
6. 凝膠儲存液（30%的丙烯酰胺） 250ml
Acr 29.2% 73g
Bis 0.8% 2g
7. 電極緩沖液（跑一次要配制2500ml）
甘氨酸 43.2g 36g
Tris 9g 或 7.5g
SDS 3g 2.5g
超純水定容至3000ml 超純水定容至2500ml
8． 0.5M Tris —HCl pH 6.8儲液
6.1g Tris先用30ml超純水溶解，再用46ml，3M HCl調pH6.8,再加水定容至100ml
9． 平衡液儲液
脲（即尿素） 36g
甘油 30% 30ml
SDS 1% 1g
0.5M Tris—HCl pH6.8 10ml 超純水定容至100ml
10. 平衡液A（一根膠條）
DTT 20mg
平衡液儲液 10ml
11．平衡液B（一根膠條）
碘乙酰氨 300mg
平衡液儲液 10ml
0.05%溴酚蘭 15ul (平衡液A、B均需臨時配制)
12．0.5%瓊脂糖10ml
瓊脂糖 0.05g
電極緩沖液 10ml
溴酚蘭 25ul
補：4、5、6的溶液需過濾后儲存于4OC備用。
C． 藥品
CHAPS 兼性離子去垢劑 去垢劑可破壞蛋白質分子之間的疏水相互作用，
SDS 離子型去垢劑 提高蛋白質的溶解性，防止在等電聚焦時析出
尿素 離液劑 可改變或破壞氫鍵等次級鍵的結構，使蛋白質
硫脲 離液劑 變性并使蛋白失活。尿素和硫脲聯合使用，可
以大大增加蛋白質的溶解性
DTT 還原劑 斷裂蛋白質分子中Cys殘基之間形成的二硫鍵，增加蛋白質的溶解性。但過分提高DTT的濃度，由于它pKa在8左右，因而會影響pH梯度。DTT在堿性pH下會去質子化，等電聚焦時會損耗，導致二硫鍵復原，蛋白質沉淀
BSA Bradford中制作標準曲線用
無水乙醇 和磷酸一起，提供Bradford中的環境
磷酸 提供Bradford中的酸性環境
Tris 構成緩沖液的成分，可用于抗衡pH的變化
IPG buffer
覆蓋液 即礦物油，防止水分蒸發，樣品干燥。
丙烯酰胺（Acr） 以丙烯酰胺為單體，甲叉二丙烯酰胺為交聯劑，
甲叉二丙烯酰胺 （Bis） 在催化劑（Aps）和引發劑（TEMED）作用下，聚合交聯成三維網狀結構
瓊脂糖
溴酚蘭 指示劑作用
碘乙酰氨（IAA） 平衡液B中使用，中和A液中的DTT
正丁醇 比聚丙烯酰胺密度小，用于凝膠制作過程中的壓膠
甘油 無機鹽的良好溶劑，熱穩定性好
Marker
考馬斯亮蘭G250（Bradford法用） 考馬斯亮蘭G250有紅、藍兩種不同顏色的形式在一定濃度的乙醇及酸性條件下，可配成淡紅色的溶液，當與蛋白結合后，產生藍色化合物，反應迅速而穩定，反應化合物在465~595nm處有最大的光吸收值，化合物顏色 深淺與蛋白濃度的高低成正比關系，因此可檢測595nm的光吸收值的大小計算蛋白的含量
甘氨酸 與Tris構成緩沖系統
AgNO3
EDTA 金屬螯合劑，可以結合銀離子，終止銀染過程