1、單卵雙胎的確定：雙胎輸血綜合征一般均為單絨毛膜雙胎，因此以B超確定其為單絨毛膜雙胎為診斷的重要條件。Barss等曾以在B超下所見為：(1)單個胎盤；(2)同性別胎兒；(3)胎兒間有頭發樣細的縱隔，確定其為單絨毛膜雙胎，獲得較高的診斷正確率。性別相異則可排除雙胎輸血綜合征診斷。Nores等報道在37例TTTs中，33例為女性，男女性別之比為1∶9。她引用James等384例單絨毛膜雙胎中74%為女性，另外96例聯體雙胎中74例為女性，有關雙胎輸血綜合征中女性占優勢的問題尚待觀察。
2、胎兒體重的差異及胎兒表現：目前，用B超對胎兒作體重估計的各項參數中，若以單項計則以腹圍最準確，不少學者認為腹圍相差20 mm,則體重相差在20%上下。Blickstein等發現胎兒腹圍相差≥18 mm，則體重相差將＞15%。另外，雙胎中一個胎兒的發育遲緩，又因羊水過少而少動，呈僵化(stuck)狀態，也是雙胎輸血綜合征中一種特有的狀態，Brown等通過B超在證實10例孕婦中6個胎兒有以上表現。
3、羊水多少的差異：羊水過多及羊水過少的存在是雙胎輸血綜合征的重要診斷條件之一。Chescheir等在7例雙胎輸血綜合征中6例B超發現有羊水過多或羊水過少。Achirhon等發現在孕18～22周時若作系列的B超檢查，則胎兒膀胱經常處于充盈狀態提示有羊水過多的可能。Rosen等比較了雙胎輸血綜合征胎兒的排尿量，3例疑為雙胎輸血綜合征者，B超檢查發現小胎兒排尿量幾乎為零，而大胎兒排尿量均在第百分之95分位上。
4、臍帶和胎盤的差異：B超中可見受血者的臍帶粗于供血者，有時受血者臍帶伴有單臍動脈。Strong研究了雙胎輸血綜合征臍帶旋轉圈數，在一定的長度內，受血兒的旋轉圈數為供血者的兩倍，除了診斷之外，作者還認為此亦可能是雙胎輸血綜合征病理基礎之一。
對胎盤用彩色多普勒超聲顯像觀察可能有助于確定雙胎輸血綜合征的胎盤血管的交通支。Hecher等曾對18例雙胎輸血綜合征(其中兩例合并無心畸形)作彩超檢查，結果發現6例胎盤的中間胎膜附著處可見供血者的血流傳向受血兒，其中一例合并無心畸形者，血液從正常胎兒流向無心畸形，在激光治療后，此現象消失，因此，Hecher認為這是一個重要的診斷方法。
5、兩個胎兒內臟的差異：Zosmer等通過觀察認為雙胎輸血綜合征中大多數受血兒可能發生心功能紊亂，從對5例雙胎輸血綜合征在孕25周前合并羊水過多的受血兒在彩色多普勒B超中發現輕至重度的肺動脈瓣狹窄或致死性心臟病變。Lachapalle等在產后證實為雙胎輸血綜合征的5例雙胎中，孕期B超發現該5例的受血兒心室壁均增厚，而供血兒的左心室部縮短，其心排出量均明顯增加，說明心肌處于過度活動狀態，而兩個胎兒的各項心臟參數的比較，特別是左心室部縮短可能有助于診斷。
Roberts等對14例雙胎輸血綜合征的兩個胎兒作了肝臟測量，發現受血兒及供血兒的肝臟大小均大于正常平均值，肝臟長度明顯大于作為對照的雙絨毛膜雙胎胎兒，故對雙胎輸血綜合征的診斷有一定價值。
目前因超聲儀器的不斷進步、預計對雙胎輸血綜合征的受血兒及供血兒心臟及其他臟器將會提供更多的發現。
6、臍穿刺：Blickstein認為在B超引導下穿刺臍血管取得血樣本對診斷雙胎輸血綜合征有較大的幫助。首先，可以用血樣證實其為單卵雙胎；其次，可以了解兩個胎兒之間的血紅蛋白水平；第三，可以了解供血者貧血狀態。Okamura曾對5例單絨毛膜雙胎的兩個胎兒在B超引導下抽取臍血，證實供血兒血紅蛋白水平為9.2 g/dl，受血兒為15.4 g/dl，因該法有一定的損傷性，故實際操作上有一定困難，至今未見更多的文獻報導。