反向PCR引物設計需要同源臂嗎

需要。
用pcr擴的時候就把同源重組片段引入，vector酶切后5端選15nt，3'端選15nt分別加到正向引物和反向引物上，就做成了同源臂。同源序列是指在同一物種不同個體間或不同物種間相同或相似的DNA序列，而同源臂是指一段同源序列，類似于trna氨基酸臂的結構，所謂臂，指的是手臂樣結構。
引物是人工合成的兩個寡核苷酸序列：一個引物與靶區域端的一條dna模板鏈互補，另一個引物與靶區域另一端的另條dna模板鏈互補，其功能是作為核苷酸聚合作用的起始點，核酸聚合酶可由其3端開始合成新的核酸鏈。