1 .準備12 支試管,按表2 進行測定。用反應時間為0 的第一管作空白對照, 此試管要先加0.1 mol/ L NaOH 后加酶。第10支試管是校正蔗糖的酸水解。用第11 管作為對照,測定第12 管葡萄糖標準的光吸收值,用以計算第2~9 各測定管所生成還原糖的μmole 數。
2 .表2 中底物蔗糖的量為每管0.25 μmol 全部反應后可產生0.5 μmol 的還原糖,所有的蔗糖和酶濃度應使底物在20 min 內基本反應完。
3 .畫出生成的還原糖的 μmol 數(即產物濃度 μmol/ ml)與反應時間的關系曲線,即反應的時間進程曲線,求出反應的初速度。

展開 |