反相鍵合相液相色譜儀流動相溶劑極性越低，洗脫能力越強。
一、常用流動相：
1、甲醇－水。
2、乙腈－水。
3、四氫呋喃－水。
溶劑強度為水＜甲醇＜乙腈＜四氫呋喃。
系統2較系統1好，原因如下：
系統2的粘度較系統1小，柱效好。粘度降低，柱壓降低，傳質阻力降低（溶質擴散阻力降低）， 柱效升高。
乙腈的紫外末端吸收較甲醇小，在低波長處測定時，基線波動較甲醇小，測定誤差小。
二、流動相的選擇：
1、二元溶劑系統：
一般以洗脫能力zui弱的水作為底劑，再加入一定量的可與水互溶的有機極性調節劑。常用的極性調節劑為甲醇和乙腈。
2、多元溶劑系統：
在二元溶劑系統中加入少量的四氫呋喃，常能改善某些難分離的物質對的分離度。
用水、甲醇、乙腈和四氫呋喃組成三元或四元溶劑系統，并進行優化，選出zui佳溶劑系統。
三、溶質保留值隨溶劑極性變化的一般規律：
有機溶劑比例減小：
1、溶劑的極性增加，洗脫能力降低，溶質的保留時間增加。
2、不同溶質組分間的分離度增加。
3、溶質的柱效降低。