抑制劑存在時，對米氏方程的修正為:
V0=Vmax[S]/(Km+α'[S])
α'=1+[I]/Ki
由上述式知，反競爭性抑制劑會改變酶對底物的Km，km減小，在底物濃度較低時，[S]<<Km，V0=Vmax[S]/Km，反應為關于底物濃度的一級反應;而在底物濃度高時，[S]>>Km，V0=Vmax/α'，減小了反應理論的最大速率Vmax，表現為"酶量減少"。
雙倒數作圖處理為:
1/v=(Km/Vmax)x(1/{S})+1/vx(1+{I}/Ki)
