磷酸可待因照高效液相色譜法(通則0512)測定。
供試品溶液取本品20片,精密稱定,研細,精密稱取適量(約相當于磷酸可待因12mg),置50ml量瓶中,加水2.5ml,超聲使崩解,加甲醇適量,超聲10分鐘使磷酸可待因溶解,放冷,用甲醇稀釋至刻度,搖勻,濾過,精密量取續濾液2ml,置10ml量瓶中,用流動相稀釋至刻度,搖勻。對照品溶液取磷酸可待因對照品,精密稱定,加流動相溶解并定量稀釋制成每1ml中約含48g的溶液。色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以0.05mol/L磷酸二氫鉀(用磷酸調節pH值至3.0)-乙腈(3.5:1)為流動相;檢測波長為220nm;進樣體積10系統適用性要求理論板數按磷酸可待因峰計算不低于1000。
測定法精密量取供試品溶液與對照品溶液,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖。按外標法以峰面積計算,并將結果乘以1.068。
桔梗皂苷取本品20片,精密稱定,研細;精密稱取約10片量,置磨口錐形瓶中,精密加水20ml,密塞,超聲15分鐘濾過,取續濾液4.0ml,置分液漏斗中,加氨水1滴,搖勻,用三氯甲烷提取2次,每次15ml,棄去三氯甲烷液,水層用水飽和的正丁醇提取5次,每次15ml,合并正丁醇液,放置20分鐘,經墊有脫脂棉的玻璃漏斗濾至已恒重的磨口錐形瓶中,置水浴90℃減壓蒸干后,在100℃減壓干燥2小時,稱重,計算桔梗皂苷的含量。本品每片含桔梗皂苷應不少于9mg。