植物葉綠體色素主要有三類：1）葉綠素 2）類胡蘿卜素 3）藻膽素。高等植物葉綠體中含有前兩類，藻膽素僅存在于藻類植物中。
| 實驗方法原理 | 葉綠體中含有綠色素（包括葉綠素a和葉綠素b）和黃色素（包括胡蘿卜素和葉黃素）兩大類。它們與類囊體膜蛋白相結合成為色素蛋白復合體。它們的化學結構不同，所以它們的物化性質（如極性、吸收光譜）和在光合作用中的地位和作用也不一樣。這兩類色素是酯類化合物，都不溶于水，而溶于有機溶劑，故可用乙醇、丙醇等有機溶劑提取。提取液可用色譜分析的原理加以分離。因吸附劑對不同物質的吸附力不同，當用適當的溶劑推動時，混合物中各種成分在兩相（固定相和流動相）間具有不同的分配系數，所以移動速度不同，經過一定時間后，可將各種色素分開。 |
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| 實驗材料 | 植物葉片材料 |
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| 試劑、試劑盒 | 95%乙醇石英砂碳酸鈣粉推動劑按石油醚丙酮苯 |
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| 儀器、耗材 | 研缽漏斗三角瓶剪刀滴管培養皿廣口瓶 |
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| 實驗步驟 | 1. 葉綠體色素的提取
（1） 取菠菜或其他植物新鮮葉片4-5片（2g左右），洗凈，擦干，去掉中脈剪碎，放入研缽中。
（2） 研缽中加入少量石英砂及碳酸鈣粉，加2-3ml 95%乙醇，研磨至糊狀，再加10-15ml 95%乙醇，離心35min，提取上清液過濾于三角瓶中，殘渣用10ml 95%乙醇沖洗，一同過濾于三角瓶中。
（3） 如無新鮮葉片，也可用事先制好的葉干粉提取。取新鮮葉片（以菠菜葉最好），先用105℃殺青，再在80℃下烘干，研成粉末，密閉儲存。用時稱葉粉2g放入小燒杯中，加95%乙醇20-30ml 浸提，并隨時攪動。待乙醇呈深綠色時，濾出浸提液備用。
2. 葉綠體色素的分離
（1） 取圓形定性濾紙一張（直徑11cm），將其剪成濾紙條（9cm×3cm），用滴管吸取乙醇葉綠體色素提取液，沿紙條的長度方向涂在紙條的一邊（距邊約1cm），使色素擴散的寬度限制在0.5cm以內，風干后，再重復操作數次。
（2） 在層析缸中加入適量的推動劑，將濾紙條帶有色素的一端插入層析缸中，使濾紙條下端浸入推動劑中。迅速蓋好層析缸蓋。此時，推動劑借毛細管引力順濾紙條向上擴散，并把葉綠體色素向上推動，不久即可看到各種色素的條帶。
（3） 當推動劑前沿接近濾紙邊緣時，取出濾紙，風干，即可看到分離的各種色素：葉綠素a為藍綠色，葉綠素b為黃綠色，葉黃素為鮮黃色，胡蘿卜素為橙黃色。用鉛筆標出各種色素的位置和名稱。 展開 |
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| 注意事項 | 葉綠體色素分離通常采用條形紙層析法和圓形濾紙層析法，條形濾紙層析法存在分離色素帶窄、濾紙條邊緣擴散過快現象影響色素帶分布、濾紙條易與試管內壁接觸造成濾液細線上的色素溶解在層析液中、色素的分離情況在燒杯內不易觀察等諸多明顯影響實驗效果 |
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| 其他 | 紙層析法分離葉綠體色素的關鍵是層析液的選擇，良好的層析液可以快速而效果良好的使色素分離開來。 |
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