對細胞的染色可以（1）讓細胞著色便于觀察；（2）對凋亡細胞的檢測。
| 實驗方法原理 | 吉姆薩染液由天青，伊紅組成。染色原理和結果與瑞特染色法基本相同。嗜酸性顆粒為堿性蛋白質，與酸性染料伊紅結合，染粉紅色，稱為嗜酸性物質；細胞核蛋白和淋巴細胞胞漿為酸性，與堿性染料美藍或天青結合，染紫藍色，稱為嗜堿性物質；中性顆粒呈等電狀態與伊紅和美藍均可結合，染淡紫色，稱為中性物質。PH對細胞染色有一些影響。細胞里各種成分均不蛋白質，因為蛋白質系兩性電解質，帶電荷隨溶液PH而定，在偏酸性環境里正電荷增多，易和伊紅結合，染色為偏紅；在偏堿性環境里負電荷增多，易和美藍或天青結合，染色偏藍。 |
|---|
| 實驗材料 | 原位雜交玻片 |
|---|
| 試劑、試劑盒 | 吉姆薩染色液磷酸鈉緩沖液乙醇二甲苯 |
|---|
| 儀器、耗材 | 染色盤培養箱濾紙 |
|---|
| 實驗步驟 | 1. 將顯影的玻片置于玻片架上，浸入盛有水的染色盤中。
（1）1個盤：pH6.8 10 mmol/l 磷酸鈉緩沖液，所配的25倍稀釋的吉姆薩染液。
（2）3個盤：水。
（3）脫水系列溶液：
①3個盤：分別盛50%、70%和95%乙醇。
②2個盤：盛有100%乙醇。
③3個盤：盛有二甲苯。 3. 在25倍稀釋的吉姆薩染液中染玻片20 s（依染色時間決定染色的強弱），將玻片在水中浸泡3次，每次2 min。
4. 連續用乙醇脫水系列溶液處理，每盤中浸泡2 min，將玻片移至二甲苯盤中，毎次浸泡2 min，共3次。 5. 在通風櫥中，按如下操作壓片固定：用一平頭鑷（拿在左手），從二甲苯中取出一塊玻片，夾住磨面端置水平。加4滴Permount 的于另一端（切片所處位置），左手拿一干凈的蓋玻片，很緩慢地放在載玻片上（在加壓片固定介質和蓋玻片前，勿使玻片變干，因微小氣泡會造成人為假象）。 6. 用3MM 濾紙，沿蓋玻片邊緣，小心吸去多余固片介質/二甲苯，并擦拭載玻片背面（勿擦拭蓋玻片）。 7. 將玻片平放于一硬紙盒盤上，置42℃溫孵箱2天使之凝固。 8. 以剃須刀片小心刮去載玻片背面殘留膠乳，染料及固片介質。用鏡頭紙或普通棉紙擦去塵埃。放入玻片盒，必要時，載玻片上再注明標簽。
9. 顯微鏡觀察玻片，觀察時可依信號強弱，調節光亮。
收起 |
|---|
| 注意事項 | 1. 勿將玻片直立存放于玻片中，因此時固片介質尚未凝結。
2. 細胞染色對氫離子濃度十分敏感，染色用正經片一定清潔，要無酸堿污染。
3. 配制頊特液一定用優質甲醇，稀釋染色一定用緩沖液，沖洗一定用水應近中性，不然可導致各種細胞染色反應異常，以致于識別困難，甚至造成錯誤的。
|
|---|
| 其他 | 染色實驗與染色濃度，細胞的多少，室溫有關，染液淡，溫度低，細胞多則染色時間較長，反之，可減少時間，必要時可增加染液量或增加時間。沖洗前，需要在低倍顯微鏡下觀察染色是否核質分明，是否染色清楚。 |
|---|
