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  • 發布時間:2019-04-07 15:06 原文鏈接: 吞噬作用實驗_粒細胞吞噬試驗

    人體和動物機體的吞噬細胞可根據其形態大小分為大吞噬細胞和小吞噬細胞,大吞噬細胞是指單核一巨噬細胞系統的細胞,小吞噬細胞主要是中性粒細胞。它們對外來的細菌或其他異物有吞噬、消化作用,是機體非特異性免疫的重要工具,同時也是特異性免疫的細胞成分,例如抗原遞呈作用等。吞噬作用是檢測吞噬細胞功能的最常用的方法之一。一般用吞噬了細菌或其他異物的吞噬細胞百分率和被吞噬的細菌或其他顆粒的數量(吞噬指數)來表示吞噬能力。

    實驗材料

    白色葡萄球菌懸液(6 億個菌 毫升)

    試劑、試劑盒

    肝素溶液(25 單位 毫升)甲醇堿性美藍染液消毒乙醇

    儀器、耗材

    血紅蛋白吸管凹玻片載玻片1 ml 注射器針頭棉球

    實驗步驟

    1. 用裝有最小針頭的 1 ml 注射器在潔凈凹玻片的凹孔內加入 0.02 ml 肝素溶液。


    2. 用乙醇棉花消毒耳垂或手指,再用消毒針頭刺破消毒處的皮膚,以血紅蛋白吸管吸取血液 0.04 ml,立即放入以上凹孔內,輕輕攪動混勻。


    3. 再用 1 ml 注射器加入約 0.02 ml 的白色葡萄球菌懸液,充分混勻。


    4. 將凹玻片放入鋪有數層濕紗布的培養皿或有蓋搪瓷盤(先放 37℃ 溫箱中預溫)內,放 37℃ 溫箱中作用 30 min,每隔 10 min 搖勻一次。


    5. 取一小滴血液與白色葡萄球菌混合液于載玻片上,取另一邊緣光滑的玻片用其邊緣按圖 1 推成薄片,待干。


    圖 1 血液推片法


    6. 滴加甲醇固定 3 min,用水沖洗,晾干。


    7. 用堿性美藍染液染色 1~2 min,水沖洗,晾干。


    8. 油鏡下觀察。數 100 個多形核白細胞中有多少個吞噬了細菌的,即為吞噬細胞百分數。



    再數此 100 個多形核白細胞中一共吞噬了多少細菌,將此總數除以 100,得出每個白細胞吞噬細菌的平均數,即為吞噬指數。


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