呼吸道合胞病毒感染對豚鼠咳嗽相關氣道功能及其神經遞質的影響
葉新民 鐘南山 劉春麗 陳如沖 趙謹
【摘要】
目的
觀察呼吸道合胞病毒RsV(感染)對豚鼠咳嗽相關的氣道功能及神經遞質的影響，探討病毒感染后咳嗽的發病機制。方法雄性SPF級豚鼠60只。按數字隨機法隨機分成正常對照組、病毒感染組和哮喘組，病毒感染組按病毒感染后天數分為6、12、28和42 d四個組，每組10只。通過滴鼻方法接種RSV。Buxco肺功能儀測定咳嗽反射敏感性(CRs)及氣道反應性(AR)。熒光定量PcR(Real—time PcR)方法檢測辣椒素受體亞型l(VRl)的mRNA表達，免疫組織化學方法檢測肺組織VRl及蛋白基因產物9．5(PGP一9．5)的蛋白表達。結果病毒感染6、12、28、42 d組豚鼠CRs[(8．oo士3．86)、(8．70士6．20)、(7．60±4．40)和(6．70±3．71)CCnt]均較正常對照組[(2．50±1．43)ccnt]升高(P值均<O．05)，并在12 d組達到最高峰(P<O．01)。感染后12 d組豚鼠AR對2個高濃度乙酰甲膽堿刺激結果為(1 069±156)％和(1 846±285)％，均高于正常對照組(P值分別<O．05和o．01)。感染后6、12和28 d組VRl的mRNA水平分別為1．57士O．43、1．61±o．47和1．68士o．56，均較正常對照組(1．OO土O．34)升高(P值均<O．05)，而以28 d組為最高。與正常對照組相比，感染后28 d組VRl蛋白表達增強(P<o．05)；而感染后12d組PGP一9．5表達增強(P<o．05)。結論CRS增高伴隨一定程度的AR增高是RSV引起咳嗽的特點，感染引起VRl和PGP一9．5的時空變化可能與病毒感染性咳嗽的發病機制有關。
【關鍵詞】呼吸道合胞病毒；咳嗽反射敏感性；氣道反應性；辣椒素受體；蛋白基因產物9．5
呼吸道合胞病毒(RSV)是人類上呼吸道感染(URI)最重要的感染病原之一，尤其是兒童。RSV大約引起兒童90％的支氣管炎，幾乎所有嬰幼兒在生后頭3年都感染過RSV[1]。因此，進行RSV感染引起咳嗽的研究具有重要意義。目前認為，咳嗽反射敏感性(CRS)異常增高是機體咳嗽反應的一個十分重要的原因。O’Connell等L21的臨床研究發現，URI引起的咳嗽患者CRS升高是其主要特征，并不伴氣道反應性(AR)增高。但是，迄今為止，有關感染后咳嗽的真正機制知之甚少，還未見到RSV感染引起咳嗽的動物研究，病毒感染往往伴發AR升高，那么AR是否在感染后咳嗽中起關鍵作用呢?
辣椒素受體亞型1(vanilloid receptor-1，VRl)是瞬時受體電位通道蛋白的超家族的成員之一。有研究發現慢性咳嗽患者VRl顯著高于健康者；而且，CRS與支氣管黏膜的VRl表達呈高度相關；氣道平滑肌VRl的表達也增強。表明VRl參與了慢性咳嗽的發病過程[3]，但病毒感染后VRl如何改變目前還缺乏研究。有研究發現，RSV感染可以引起標記呼吸道總神經纖維分布的蛋白基因產物9．5(protein gene product一9．5，PGP一9．5)的分布及表達
水平改變[4]。本研究將通過動態觀察與咳嗽有關的CRS、AR、VRl和PGP一9．5蛋白的變化，探討RSV引起咳嗽，尤其是感染后咳嗽的發病機制。