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  • 發布時間:2023-03-17 14:59 原文鏈接: 噬菌體侵染細菌實驗步驟

    有四個步驟,分別是:

    1、培養用p32和s35 標記的大腸桿菌,再用此大腸桿菌培養噬菌體。p32用于標記噬菌體蛋白質,s35 用于標記噬菌體DNA。

    2、用培養后的p32和s35噬菌體侵染未被標記的的大腸桿菌。

    3、培養物離心,分離。

    4 、分別對上清液和沉淀物的放射性進行檢測。上清液中有S35,而沉淀中幾乎沒有;沉淀中有P32而上清液中幾乎沒有。

    Alfed Hershey和Martha Chase(1952)將宿主大腸桿菌細胞分別放在含放射性同位素35S或32P的培養基中,用35S標記蛋白質,32P標記蛋DNA。宿主細胞在生長過程中就被35S或32P標記上了。然后用T2噬菌體分別感染被35S或32P標記的細菌,并在這些細菌中復制增殖。

    宿主菌裂解釋放出很多子代噬菌體,這些子代噬菌體也被標記上35S或32P。然后用分別被35S,或32P標記的噬菌體去感染沒有被放射性同位素標記的宿主菌,然后測定宿主菌細胞帶有的同位素。被35S標記的噬菌體所感染的宿主菌細胞內很少有35S,而大多數35S出現在宿主菌細胞的外面。

    也就是說,35S標記的噬菌體蛋白質外殼在感染宿主菌細胞后,并未進入宿主菌細胞內部而是留在細胞外面。被32P標記的噬菌體感染宿主菌細胞后,測定宿主菌的同位素,發現32P主要集中在宿主菌細胞內。所以噬菌體感染宿主菌細胞時進入細胞內的主要是DNA。


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