四膜蟲的保存實驗——四膜蟲的冷凍

細胞

Tris

培養基

1. 在培養基中將細胞培養至對數生長中期。如需要，可使用抗生素和/或殺真菌劑。

2. 在 pH 7.4 的 10 mmol/L Tris 中低速離心輕洗細胞 1 次，棄上清，低速離心重懸細胞，棄上清。

3. 用 10 mmol/L Tris 重懸細胞至初始體積。

4. 30℃ 孵育細胞 3 天，不振搖，使細胞饑餓。

5. 低速離心濃縮細胞，棄上清，獲得細胞濃度約 4X10⁶ 細胞/ml。

6. 在 3 ml 高質量的 13.3% DMSO 中重懸 2 ml 細胞。

7. 少量體積分裝入 2 ml 的冷凍管中。

8. -70℃ 或 -80℃ 貯存 24 小時。