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  • 發布時間:2021-03-24 09:59 原文鏈接: 地高辛配基隨機標記DNA探針試劑盒成份

      1.無標記對照DNA1

      此管內有20μl pBR328 DNA100μg/ml,pBR328分別用BamHⅠ,BglⅠt HinfⅠ消化,它們的混合比例為2:3:3,共有16個Pbr328片段,這些片段的大小分別為:4907,2176,1766,1230,1033,653,517,453,298,234,234,220和154×2bp。

      2.無標記對照DNA2

      此管內有20μl pBR328 DNA200μg/ml,已用EcoRⅠ線性化。

      3.DNA稀釋緩沖液

      有兩管,每管1ml[成分為:Tris-HCl(10mmol/L),EDTA(1mmol/L),pH8.0(20℃)]內含鮭魚精DNA(50μg/ml)。

      4.標記對照DNA

      此管內有50μl線性化pBR328DNA,按標記方法已標記有地高辛配基dUTP,含20μg模板DNA,每毫升含5μg合成的標記DNA。

      5.六聚核苷酸混合物

      6.標記用混合底物

      此管內有50μl 10倍濃度的dNTP標記用混合底物,含dATP(1mmol/L)dCTP(1mmol/L),dGTP(1mmol/L),dTTP(0.65mmol/L)和Dig-dUTP(0.35mmol/L),pH6.5(20℃)。

      7.DNA聚合酶Ⅰ大片段(標記級)

      此管內有25μl DNA聚合酶Ⅰ大片段(Klenow),2U/μl。

      8.(Dig)AP結合物

      此管內有200μl多克隆羊抗地高辛配基Fab-片段,結合有堿性磷酸酶750U/ml。

      9.NBT

      有兩管,每管1.25ml,是溶于70%(V/V)二甲基甲酰胺的硝基藍四唑鹽溶液(75mg/ml)。

      10.X-磷酸鹽

      有兩管,每管0.9ml,是溶于二甲基甲酰胺的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸鹽的甲苯胺溶液(50mg/ml)。

      11.封阻試劑

      有兩瓶,每瓶有50g粉劑。


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