②支原體污染。
③培養瓶瓶底不干凈。
④培養液ph
值過堿（nahco3
分解）。
⑤消化液或培養液配制錯誤、過期儲存、儲存不當。
⑥細胞老化（如傳代前細胞已匯合導致失去貼附性）。
⑦接種細胞起始濃度太低或太高。
建議解決方法：
①縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度。
②分離培養物，檢測支原體。清潔支架和培養箱。如發
現支原體污染，丟棄培養物。
③注意刷洗，或換用一次性塑料培養瓶。
④使用無菌醋酸溶液調整ph
值或充入無菌co2（將培
養液敞口放入培養箱也可）。
⑤重新配置消化液或培養液。
⑥啟用新的保種細胞。
⑦調節最佳接種細胞濃度。