培養細胞的染色實驗——Giemsa染色法

Giemse甘油甲醇Sorensen

滴管玻璃片

1.  染液制備

（1）稱Giemse粉0.5 g、甘油22 ml，在研缽內先用少量甘油與Giemsa充分混合，研磨至無顆粒；

（2）再將剩余甘油混在一起；56 ℃保溫2 小時后，加入33 ml純甲醇，保存于棕色瓶內。

2.  染色步驟（以蓋片培養法或涂片法為例）

（1）用pH6.8~7.38的Sorensen緩沖液，按1：9 比例取Giemsa染液和Sorensen緩沖液混合配成染色液；

（2）細胞標本用甲醇固定10 分鐘，或1：3醋酸/甲醇固定30 分鐘，用滴管把染色液布滿玻片上（注意不要有氣泡，用染色缸染色亦可）；

（3）染10~15 分鐘后，用自來水沖去玻片上多余的染料，空氣干燥、二甲苯透明、光學樹脂膠封固。

3.  結果

胞核染成紫紅色或藍紫色，胞漿染成粉紅色。

1.  染色液宜現用現配，保存時間最好不超過48 小時，舊染液染色效果不好。

2.  Giemsa 對pH 極敏感，緩沖液pH 值要調準確，否則染色效果不好。

3.  用染色缸染色時，隨染色時間的延長，在染液表面常形成一層氧化膜（發亮），這層氧化膜易附在片上形成污穢，且不易除掉。因此在用染色缸染色，尤其用的不是現配者時，染色前應先用小片濾紙刮除液面的氧化層再進行染色。

4.  染色完畢，應把標本浸入水中洗除染液，或用自來水直接沖掉多余染液。