2 結果
2.1 大鼠代謝水平 由表 1 可見，與對照組 P1 比較，模型組 P1 大鼠的體質量、進食量和進水量均下降，該組大鼠出現消瘦和食少；與對照組 P2 比較，模型組 P2 的體質量、肛溫、進食量和進水量均減少，該組大鼠出現了消瘦、畏寒和食少，而大便含水率增加，該組大鼠出現便溏；與模型組 P1 比較，模型組 P2 的體質量和肛溫均下降，但大便含水率升高。
2.2 大鼠神疲乏力情況 圖 1 和表 2 可見，對照組P1 和 P2 比較無明顯差異，大鼠活動區域大，運動距離遠，站立次數多，前肢抓力大；與對照組 P1比較，模型組 P1 和 P2 的活動區域明顯變小，運動距離、站立次數和前肢抓力均明顯下降，提示兩組大鼠出現了神疲和乏力現象；與模型組 P1 比較，模型組 P2 的活動區域更小，甚至沒有形成閉合運動軌跡，上述 3 個指標均降低，表示該組大鼠的神疲和乏力更加嚴重。
3 討論
動物模型是中醫證候研究的重要內容，其復制過程應符合中醫理論，不能單純進行癥狀模擬，還應考慮病因，甚至是模擬相關病機。通常認為，脾陽虛的發生多源于脾氣虛，也可因外寒直中、苦寒傷陽和腎陽不足。由于病因較多，本研究僅選擇了脾氣虛和苦寒傷陽兩個進行模擬，即以脾氣虛大鼠為對象，通過灌服番瀉葉，達到損傷脾陽的目的。而在復制脾氣虛模型時，首先考慮的仍然是病因病機。誘發脾氣虛的病因有飲食不節，勞倦過度，憂思日久，稟賦不足，素體虛弱，年老體衰，大病初愈，調養失慎等。還是由于病因較多，本研究選擇了較為常見的飲食不節和勞倦過度進行模擬，即采用飽食 1 d，饑餓 2 d，結合每日力竭游泳，造成脾氣虛。因此，本實驗在復制脾陽虛模型的過程中，先后施加的因素有飲食失節、勞倦過度和苦寒傷陽，分別模擬了脾氣虛和脾陽虛證的部分病因病機，同時也限定了本實驗所復制的脾氣虛為飲食不節和疲勞型，脾陽虛為脾氣虛和苦寒傷陽型。
由于模型復制為階段性，其評價也應分階段進行，從而有效質控模型復制過程。本研究依據二證的臨床辨證要點，結合大鼠的生物學特征，建立了較為簡便易行的模型評價標準。首先根據脾氣虛的臨床辨證要點，即食少、腹脹、便溏及氣虛證等，建立大鼠脾氣虛的評價標準為：消瘦，食少，神疲，乏力；其次根據脾陽虛的臨床辨證要點，即脾氣虛的癥狀加虛寒證，設立大鼠脾陽虛證的模型評價標準為：消瘦，食少，神疲，乏力，畏寒，便溏。實際上，后一評價標準為前一標準加上畏寒和便溏，即脾氣虛加寒象，這體現了模型評價的連續性。依此標準，本研究在造模的 P1 和 P2 進行階段性評價。探索客觀簡便的模型評價方法一直是中醫證候模型研究的重要內容，其目的是減少主觀因素對實驗的干擾，提高模型復制的成功率，確保模型復制的穩定性，從而保證實驗結果的可重復性。針對上述評價標準，本實驗建立了較為客觀和簡便的檢測方法，以評估大鼠的類人癥狀。實際上，目前已經能夠通過檢測大鼠的體質量、肛溫、進食 / 水量和大便含水率等，分別對消瘦、畏寒、食少和便溏等進行量化評價。本實驗結果顯示，模型組 P1 的體質量、進食 / 水量均低于對照組 P1，但肛溫和大便含水率無明顯變化，表明大鼠在接受 15 d 的飲食不節和力竭游泳刺激后，出現了消瘦和食少，但無畏寒和便溏現象；模型組 P2 的體質量、進食 / 水量、肛溫均
低于對照組 P2，且大便含水率顯著增加，說明該組大鼠出現了消瘦、食少、畏寒和便溏等類人癥狀。
與上述指標不同，“神疲”和“乏力”屬于自述性疲勞癥狀，僅憑目測難以客觀判定大鼠的疲勞程度，特別是難以區分二者在脾氣虛和脾陽虛中的差別。本課題組前期工作提出，“神疲”和“乏力”均屬于疲勞范疇，但前者主要是中樞性，后者則為外周性，可以分別采用曠場實驗和檢測大鼠雙前肢抓力進行客觀評價。本實驗觀察到，對照組 P1和 P2 大鼠進入檢測箱后，更多地活動于四周較暗區域，并有快速通過中心強光區域的現象，其運動距離遠、站立次數多，顯示這些大鼠能夠準確感知不同區域的光照強度，具有明顯的趨暗現象，并對新鮮環境表現出較強的探索能力，反映了大鼠的中樞神經系統處于明顯興奮狀態。與此相比，模型組P1 和 P2 的活動范圍小，運動距離和站立次數均顯著降低，提示大鼠中樞神經系統的興奮度程度較低，探索“意愿”較差，處于“神疲”狀態。在大鼠雙前肢抓力方面，結果顯示模型組 P1 和 P2 的前肢抓力分別低于對照組 P1 和 P2，提示大鼠出現“乏力”表現。
匯總上述實驗結果，可以看出，模型組 P1 的體質量、進食 / 水量、曠場中運動距離和垂直活動次數，以及前肢抓力等，均顯著低于對照組 P1，表明該組大鼠出現了消瘦、食少、神疲和乏力等類人癥狀，處于脾氣虛狀態。而模型組 P2 的上述指標與肛溫均顯著低于對照組 P2，且大便含水率顯著增加，說明該組大鼠除了產生脾氣虛的類人癥狀外，還有畏寒和便溏現象，已經處于脾陽虛狀態。此外，通過模型組 P1 和 P2 之間的比較，還可以發現脾陽虛時大鼠的體質量、肛溫、運動距離和站立次數明顯低于脾氣虛，大便含水率顯著高于脾氣虛，但兩者在進食 / 水量方面沒有明顯差異，這些說明從脾氣虛發展為脾陽虛時，盡管大鼠的納少癥狀沒有進一步加重，但大鼠更加消瘦，神疲和乏力更為嚴重，并出現了畏寒和便溏等較為明顯的寒象。
綜上所述，本研究所采用的階段式造模方法和評價標準，能夠成功地復制大鼠的有限性脾陽虛證模型，并且在消瘦、神疲、乏力、畏寒和便溏等方面與脾氣虛進行有效區分。