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  • 發布時間:2020-07-20 16:58 原文鏈接: 基因槍介導pVaxDsredIRESEGFP質粒轉染體外培養細...(三)

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    基因槍技術, 又稱為微粒轟擊技術( Particle Bombardment Technology),其基本原理就是將外源基因包裹到比重較大而化學性質很穩定的微米級的金或鎢上,然后用微粒加速裝置打入靶細胞或組織。早期多用于在植物中轉移基因。它通過提供給包裹有DNA的金顆粒很高的初速度,使其穿透植物的細胞壁,而達到質粒DNA有效的轉移入細胞內的目的。隨后,這項技術被應用于哺乳動物實驗系統[10]。本實驗所用的基因槍是依靠氦氣提供給金顆粒很高的初速度,使其穿透靶細胞表面,將目的基因帶入細胞。即使微顆粒被導入到細胞之間,作為異物的它們也可能誘導細胞產生吞噬作用,從而進一步增加外源基因進入細胞的概率。

    非病毒基因遞送系統是未來的發展方向,是現在基因治療的熱點研究內容, 基因槍作為一種純物理的基因轉移方法, 已成功地介導多種目地基因的體內外轉移, 在腫瘤基因治療中發揮著重要作用,基因槍技術在腫瘤基因治療中必將發揮更大的作用。本試驗研究可以說明國產新芝SJ-500型基因槍可以有效的轉導外源基因,為小鼠腫瘤治療模型的基因槍經皮免疫治療奠定了堅實基礎和可靠依據。目前報道較多的是美國BIO-RAD公司的Helios基因槍,而國產基因槍應用目前在國內報道很少,國產基因槍相對于進口槍,降低了科研成本,更加有利于推廣。

    而我們所使用的國產新芝SJ-500型手提式基因槍在轉染體外培養的細胞系時,在使用過程中仍然發現一些不足之處,特別是轉染效率尚不夠高,這可能與金顆粒的大小,每顆子彈的攜金量(MLQ)以及金顆粒上包裹的DNA量(DLR)、轟擊槍數、轟擊距離、轟擊壓力等諸多因素有關,還需要進一步進行研究和探索。


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