微彈制備（金粉母液配制）
（1）稱取60mg金粉加入Eppendorf管。
（2）加入1mL 75%乙醇，充分渦旋，靜置15min，1500rpm離心5min。
（3）棄上清，加入1mL無菌水，充分渦旋，1500rpm離心5min。重復3次。
（4）棄上清，加入1mL無菌的50%甘油，充分渦旋，-20℃保存。
DNA的包裹
（1）取50μL金粉懸液（指金粉母液）于Eppendorf管。
（2）依次加入5μL質粒DNA（1μg/μL）,50μL 2.5MCaCl2和20μL 0.1M亞精胺。（邊渦旋邊加入，每加完一樣，可振蕩2-3秒）。
（3）將上述混好的樣品，渦旋1min，冰上靜置1min，重復10次。
（4）冰上靜置30min。10000rpm離心10sec，去上清。
（5）用250μL無水乙醇沖洗沉淀2次(10000rpm離心10sec，去上清)。
（6）最后用60μL無水乙醇重懸顆粒。
注：金粉很容易沉淀，點膜前要重懸。
PDS-1000/He型基因槍的操作步驟
轉化前先靶材料放在高滲培養基（含0.2M山梨醇和0.2M甘露醇的MS培養基）上培養4h（愈傷組織集中放在培養基中間一，直徑2-3cm左右）。
（1）在超凈臺上，75%酒精棉擦洗轟擊室，75%乙醇消毒各配件15min，然后晾干。
（2）取10μL DNA包被的金顆粒點于顆粒子彈載體膜中心（一滴一滴滴加，待第一滴干燥后，滴加第二滴，防止金粉顆粒擴散太大）。
阻擋網載體膜
可裂膜
（1）打開真空泵和基因槍的電源開關。真空泵的電源開關，基因槍的電源開關，可裂膜擋蓋微粒發射裝置
（2） 打開氦氣瓶閥門，旋轉氦氣調節桿，使氣壓高于所選可裂膜壓為1500psi 左右。
（3） 旋下可裂膜擋蓋，將可裂膜放在擋蓋中央（要放正，防止漏氣），將擋蓋旋上，用專用扳手加固。
（4） 把微粒發射裝置移出轟擊室，旋下蓋子，加入阻擋網，把微粒載片安裝在固定槽中（有微粒的一面朝下），旋上蓋子，將微粒發射裝置放回轟擊室。先打開主閥，再旋轉氦氣調節桿該表上的氣壓大于可裂膜的壓強。
（5） 將樣品盤放置在轟擊室的適當位置，關上轟擊室門。點上微粒，微粒朝下。
（6）取出微粒發射裝置，卸下微粒載膜和阻擋網（阻擋網和微粒載片固定槽放入70%的酒精中浸泡）。
（7）旋下可裂膜擋蓋，清除可裂膜碎片。
（8）若PDS-1000/He 不再使用時，關掉氦氣瓶的主閥，按住FIRE 開關，放掉氣體加速管內的氦氣壓力，最后關掉一切電源。
注：
（1）可裂膜和微粒載片使用前現在75%的酒精中浸泡10分鐘，然后晾干待用。
（2）可裂膜擋蓋，微粒發射裝置等使用前先用75%的酒精擦洗消毒。
（3）可裂膜，阻擋網和微粒載片需用平頭鑷子夾取。
（4）亞精胺一般現配現用，如經常使用，可配成1M 的母液，分裝于Eppendorf 管中，可于-20℃保存1-2個月。
（5）轟擊后靶材料在高滲培養基上培養一段時間（16-20h 左右），再轉至其他培養基上培養。高滲培養基就用一般的MS 培養基，0.7-1.5%的瓊脂，加0.2M 的山梨醇0.2M 的甘露醇，滅菌后倒平板，洋蔥選擇里面新鮮的嫩葉切成小塊1-2cm 長，置于培養基上，哪面朝向培養基好像沒什么關系，高滲的作用是使細胞失水。轟洋蔥表皮細胞的參數：1350psi 的可裂膜，26-28in Hg 的真空度，轟擊距離6cm 。轟水稻愈傷組織的參數：1100psi 的可裂膜，26-28in Hg 的真空度，轟擊距離9cm 。
按V AC 開關（上檔）抽真空。當真空表讀數為所需值時（27-28in Hg ），開關打到HOLD 開關處（下檔）
然后按住FIRE 開關，當達到適當壓力，可裂膜自動破裂后（可聽見“啪”一聲），松開FIRE 開關開關打到VENT 處（中間檔），以釋放轟擊室內的真空（否則轟擊室門打不開）