基因活性的同位素分析實驗——原位裂解細胞的CAT分析法

轉染細胞

Triton裂解液

培養皿培養箱

1.  60 mm 培養皿中轉染了CAT表達質粒的細胞，用2 ml PBS洗1次。每培養皿加入2 ml 低滲緩沖液，在室溫下溫育2~5 min。

2.  吸去低滲緩沖液，加入400 μl Triton裂解液。用橡膠刮子將細胞刮離培養血，用1 000 μl 移液器將裂解物移入1.5  ml 微量離心管中。

3.  微量離心1 min 除去細胞核，不可溶性蛋白。將上清轉入一個干凈的微量離心管中， 進行CAT活性分析。