照高效液相色譜法(通則0512)測定供試品溶液取本品20片,精密稱定,研細,精密稱取適量(約相當于呋塞米40mg與鹽酸阿米洛利5mg),置200ml量瓶中,加甲醇15ml與0.1mol/L鹽酸溶液2ml,超聲約1分鐘使呋塞米與鹽酸阿米洛利溶解,放冷,用流動相稀釋至刻度,搖勻,濾過,取續濾液對照品溶液取鹽酸阿米洛利對照品,精密稱定,加甲醇溶解并定量稀釋制成每1ml中約含1mg的溶液作為對照品溶液(1);另取呋塞米對照品約40mg,精密稱定,置200ml量瓶中,加甲醇15m1與0.1mol/L鹽酸溶液2ml,超聲約15分鐘,放冷,再精密加對照品溶液(1)5ml,用流動相稀釋至刻度,搖勻色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以水甲醇-磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀13.6g,加水80ml使溶解,用磷酸調節pH值至3.0,用水稀釋至100ml)(50:49:1)為流動相;檢測波長為286nm;進樣體積20pl系統適用性要求理論板數按呋塞米峰計算不低于2000,呋塞米峰與阿米洛利峰之間的分離度應符合要求測定法精密量取供試品溶液與對照品溶液,分別注人液相色譜儀,記錄色譜圖。按外標法以峰面積分別計算呋塞米與鹽酸阿米洛利的含量。