實驗材料 CD3 單抗HLA-B27 單抗全血
試劑、試劑盒 溶血劑多聚甲醛
儀器、耗材 流式細胞儀
實驗步驟
1. 取熒光素 PE 標記的 CD3 單抗及 FlTC 標記的 HLA-B27 單抗 30 μl、EDTAK3 抗凝的全血 50 μl,混勻后室溫染色 15 min ( 或 20 min)。
2. 加溶血劑 2 ml 溶解紅細胞(10 min)。
3. 1500 r/min 離心洗滌除去細胞碎片,加 1% 多聚甲醛固定 ( 15 min)。
4. 上機測定。在測完標準微球并調節好 Fl1 電壓后,不可改變 FL1 的設置。通過 CD3-PE/SSC 設“門”'圈定 CD3 陽性細胞(T 淋巴細胞),檢測其 B27 的平均熒光強度。如標本熒光強度小于標準微球熒光強度則為陰性,相反為陽性。
5. 給出流式細胞儀檢測結果并發出實驗報告。