如何確定氣相色譜的分析條件

氣相分析操作條件的確定
在氣相色譜分析中,我們要快速有效的分離一個復雜的樣品，并獲得滿意的結果，除了要選擇一根最佳色譜柱以外，還要對分離操作條件進行仔細的選擇。色譜柱的好壞關系到分離的效果，而分離條件的設置又影響著色譜柱的分離。色譜柱和分離操作條件之間是是相輔相成的關系。本文將主要介紹氣相分析操作條件的確定。
初始操作條件的確定
確定初始操作條件;色譜柱形式的選擇;分離條件優化;程序升溫。
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、確定初始操作條件
進樣量要根據樣品濃度、色譜柱容量和檢測器靈敏度來確定。樣品濃度不超過mg/ml時填充柱的進樣量通常為1~5μL，而對于毛細管柱，若分流比為50：1時，進樣量一般不超過2μL。如果這樣的進樣量不能滿足檢測靈敏度的要求，可考慮加大進樣量，但以不超載為限。進樣口溫度主要由樣品的沸點范圍決定，還要考慮色譜柱的使用溫度。即首先要保證待測樣品全部氣化，其次要保證氣化的樣品組分能夠全部流出色譜柱，而不會在柱中冷凝。原則上講，進樣口溫度高一些有利，一般要接近樣品中沸點最高的組分的沸點，但要低于易分解組分的分解溫度，常用的條件是250~350℃。實際操作中，進樣口溫度可在一定范圍內設定，只要保證樣品完全汽化即可，而不必進行很精確的優化。注意，當樣品中某些組分會在高溫下分解時，就應適當降低汽化溫度。必要時可采用冷柱上進樣或程序升溫汽化(PTV)進樣技術。
色譜柱溫度的確定主要由樣品的復雜程度和汽化溫度決定。原則是既要保證待測物的完全分離，又要保證所有組分能流出色譜柱，且分析時間越短越好。組成簡單的樣品最好用恒溫分析，這樣分析周期會短一些。特別是用填充柱時，恒溫分析時色譜圖的基線要經程序升溫時穩定得多。對于組成復雜的樣品，常需要用程序升溫分離，因為在恒溫條件下，如果柱溫較低，則低沸點組分分離得好，而高沸點組分的流出時間會太長，造成峰展寬，甚至滯留在色譜柱中造成柱污染;反之，當柱溫太高時，低沸點組分又難以分離。
毛細管柱的一個最大優點就是可在較寬的溫度范圍內操作，這樣既保證了待測組分的良好分離，又能實現盡可能短的分析時間。一般來講，色譜柱的初始溫度應接近樣品中最輕組分的沸點，而最終溫度則取決于最重組分的沸點。升溫速率則要依樣品的復雜程度而定。建議毛細管柱的嘗試溫度條件設置為：
OV-1(SE-30)或SE-54柱：從50℃到280℃，升溫速率10℃/min;
OV-17(OV-1701)柱：從60℃到260℃，升溫速率8℃/min;
PEG-20M柱：從60℃到200℃，升溫速率8℃/min。
檢測器的溫度是指檢測器加熱塊溫度，檢測器溫度的設置原則是保證流出色譜柱的組分不會冷凝同時滿足檢測器靈敏度的要求。大部分檢測器的靈敏度受溫度影響不大，故檢測器溫度可參照色譜柱的最高溫度設定，而不必精確優化。
載氣流速的確定相對容易一些，開始可按照比最佳流速(氮氣約為20cm/s，氦氣約為25cm/s，氫氣約為30cm/s)高10%來設定。然后再根據分離情況進行調節。原則是既保證待測物的完全分離，又要保證盡可能短的分析時間。用填充柱時，載氣流速一般設為30ml/min。空氣，300~400ml/min;氫氣30~40ml/min;氮氣(尾吹氣)30~40ml/min。