一般分為8步:
1、預變性:可用94~95℃,2~10min,一般用5min。
2、變性:一般用94℃,30s~2min,一般45s~1min。
3、退火:溫度自定,30s~2min。
4、延伸:70~75℃,一般72℃,對于〈2kb,<1min;>2kb,每增加1kb加1min。
5、循環數:一般25~35個循環。
6、最終延伸:72℃,5~15min。
7、保存:10℃,時間設為0。
8、END。