一、產前診斷
檢查孕婦及丈夫的血型。孕婦到妊娠第16周時查血清抗體，作為基礎水平，至28～30周時再測抗體，以后每月測一次。如抗體效價上升，提示胎兒可能受累。在孕期28～31周時宜同時測定羊水膽紅素和羊水卵磷脂(L)鞘磷脂(S)比值；如L/S≥2，提示胎兒肺已成熟，有條件考慮提早分娩。
對Rh陰性孕婦用PCR法檢測羊水中胎兒RhD血型的基因，也可直接從孕婦靜脈血中用熒光PCR法測出胎兒RhD的DNA，以確定胎兒的血型。
二、產時診斷
檢查胎兒面臍血的血型和特異性抗體。
三、產后診斷
1．血常規檢查 示紅細胞數和血紅蛋白量減少，網織紅細胞可增至5%～6%，幼紅細胞在生后1～2天內可達2～10個/100白細胞。
2．血清總膽紅素增高，以非結合膽紅素為主。
3．血型和血液抗體檢查
(1)ABO溶血癥：分別檢測孕母和嬰兒血型；直接和間接抗人球蛋白試驗常陰性；但以“最適合稀釋度抗人球蛋白血清”作“抗體釋放試驗”，可得陽性結果。
(2)Rh溶血病：分別檢測孕母和嬰兒Rh血型；新生兒抗人球蛋白直接和間接試驗均陽性；以新生兒血清與標準Rh紅細胞作凝集試驗，根據凝集結果判定新生兒血清中存在的Rh抗體的型別，可以明確診斷Rh溶血病的類型。