導語:在上期中,我們對拉曼光譜及其便攜式光譜儀作了簡單的介紹,這次就讓我們來看看光譜儀光學模塊的內部構造吧。便攜式拉曼光譜儀的光學模塊主要包括激發光源、拉曼探頭以及分光系統。
激發光源的選擇
拉曼散射的產生需要光進行激發。由于拉曼散射的光強較弱,所以拉曼光譜儀的理想激光光源必須具有良好單色性,高強度和良好的偏振性。
目前,大多數的拉曼光譜儀使用波長為532nm和785nm的激光源,另外還有 633nm,1064nm等波長。拉曼位移與選用的激光源波長是多少nm無關。雖然同一樣品用不同激光照射所產生的頻移相同,但仍需要對激光光源的波長進行選擇。
激光光源的波長越小,拉曼散射光強越大,但拉曼信號也越容易被熒光遮蔽。對于生物樣本,如果采用 532nm的激光,拉曼信號會被熒光背景遮蔽,這種情況下,使用633nm或785nm的激發波長可以有效地降低熒光背景。
使用波長較長的激光源時如1064nm,拉曼散射光強低,為了讓拉曼散射光容易觀察,就需要增大激光源的功率,或者提高曝光時間。對于生物樣本,用波長較長的激光源顯然具有更好的效果,但也需要主要光強的問題。
因此,需要綜合考慮熒光背景噪聲和激光器的激光功率。由于785nm激光器的熒光背景噪聲較小,而且通常785nm激光器的激光功率比532nm和633nm激光器強,與1064nm激光器相比,785nm的激發光產生的拉曼信號更強并且不需要很長的曝光時間。所以785nm波長的激光器是便攜式拉曼光譜儀的理想選擇。

激光探頭的原理
拉曼探頭的功能是傳導,收集,還有濾波。相應的拉曼探頭的主要組成部分是入射光纖、收集光纖、濾波片等。
從激光器輸出的光由入射光纖導入,并照射到樣品上。激光作用于樣品并產生拉曼信號。接收光路收集拉曼信號。濾波片用于過濾瑞利散射(非拉曼散射)信號,同時保留拉曼散射信號。最后由收集光纖將拉曼散射信號傳入分光系統。
拉曼探頭的常用結構分為兩種。
一種是雙光纖的拉曼探頭。簡易原理如下圖所示。入射光纖與收集光纖各為一根。激發光源從入口11處進入,經過透鏡13和濾波片15,透鏡17將光折射并使光聚焦于樣品。透鏡17收集來自于樣品的拉曼散射光并過濾掉瑞利散射,最后經過濾波片16和透鏡14將拉曼信號傳入收集光纖中。

另一種是多光纖的拉曼探頭。簡易原理如下圖所示。中間的光纖是入射光纖。周圍的其余光纖都是收集光纖。由于收集光纖數量多,因此它的靈敏度較高。但同時價格也高于雙光纖拉曼探頭。
分光系統的原理
分光系統是光譜儀的最重要部分。分光系統是把包含多種波長成分的光分開,射向不同的方向,成為許多波長范圍狹小的單色光,從而能夠辨認出入射光的波長成分。
根據色散元件,分光系統可以分成兩種類型:棱鏡和光柵。

棱鏡分光系統的光學儀器是三棱鏡。它是一種透明材料并具有三角形剖面的光學儀器。由于棱鏡所能提供的色散能力較弱,所以棱鏡分光系統的分辨率較低,在現代光譜儀中已經基本被淘汰。這里就不在多做介紹。
光柵分光系統的工作原理是光的衍射。光柵可分為透射光柵和反射光柵。透射光柵是光學平板玻璃上具有相等間距的劃線,劃線處光線不能穿過,不是劃線的地方則是光線可以穿過的狹縫;反射光柵是在金屬鏡上具有相等間距的劃線,劃線上發生漫反射,未劃線處發生衍射,相當于一組衍射狹縫。通常采用反射光柵作為分光系統。

圖中可以看出,不同波長的光在通過反射光柵之后具有不同的衍射角,實現了分光。反射光柵的色散能力越強,將波長差距很小的光分離開的能力就越強,意味著光柵的分辨率越高。因此,光柵的色散能力成為分光系統的首要考慮因素。
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