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  • 發布時間:2020-04-13 22:30 原文鏈接: 如何選擇符合您需求的HPLC或UHPLC色譜柱?(四)

    圖10:加速柱穩定性研究:pH 1.9時80℃

    酸性暴露條件:

    流動相:5:95 MeOH/0.1% TFA(溶于水中)(pH 1.9)

    流速:0.20 mL/min

    溫度:80 ℃

    色譜柱尺寸:50 x 2.1mm

    分析物:菲



    使用設計用于加速柱降解下的條件,ACE C18-AR相顯示保留損失極少,其壽命相當于高度穩定的ACE C18相。兩種固定相均由相同的超純硅膠而制成,而且比Zorbax SB-C18的耐久性更好(Zorbax SB-C18曾視作在高溫和低pH條件下具有極好穩定性的固定相)。

    正如預期的那樣,基于低純度硅膠(Waters Spherisorb ODS2)的C18鍵合柱在這些加速條件下壽命大大降低。

    特別值得注意的是常規苯基色譜柱與ACE C18-AR的壽命比較結果。與ACE C18-AR相比,盡管使用高純度二氧化硅,苯基色譜柱的壽命仍降低,這表明ACE C18-AR可能適用于那些使用苯丙基色譜柱壽命短的應用。

    將HPLC和UHPLC連接到通常被稱為LC-MS的質譜儀上已經相當普遍。

    然而,質譜對可能從HPLC/UHPLC色譜柱上洗脫下來的微量的鍵合相(稱為柱“流失”)非常敏感。柱流失可能會干擾分析結果,并且重要的是,LC-MS應用中所選擇的色譜柱具有足夠穩定的鍵合相以避免過量的柱流失。

    圖11表明ACE C18-PFP色譜柱幾乎沒有“流失”干擾LC-MS分析。

    C18-PFP(以及ACE C18和ACEC18-AR)的穩定性使得這些色譜柱更適合LC-MS應用。

    圖 11:ACE C18-PFP色譜柱的低柱流失使其成為LC/MS應用中的理想選擇

    條件

    色譜柱尺寸:50 x 3.0 mm

    流動相:梯度:在5分鐘內從5至95% B,95% B時持續5分鐘

    A: 0.1%甲酸(溶于水中)

    B: 0.1%甲酸(溶于乙腈中)

    流速:0.43 mL/min

    溫度:60oC

    檢測:安捷倫1100 MSD ESI正離子快速掃描模式,快速掃描全50 – 1000 m/z

    樣品:空白運行


    柱流失可能會干擾LC-MS應用中目標分析物的檢測和測量。

    ACE C18-PFP色譜柱未顯示柱流失。

    所有ACE色譜柱的低流失特性使其非常適合LC-MS應用。

    UHPLC色譜柱可能缺乏耐用性。加上入口篩板堵塞的可能性,您可能面臨色譜柱的耐用性不如HPLC色譜柱的問題。

    ACE Excel色譜柱非常寬容,并提供您期望從HPLC色譜柱中獲得的相同耐用性和使用壽命。

    ACE Excel將改變您對UHPLC色譜柱耐用性的看法。

    ACE Excel色譜柱不僅填裝的更好,還采用了ZL的入口篩板設計,使其比其它UHPLC色譜柱更不容易被堵塞。

    仍建議您像使用任何UHPLC色譜柱一樣過濾樣品和流動相,但ACE Excel色譜柱比其他UHPLC色譜柱更為寬容,并提供與HPLC色譜柱相同的耐用性和使用壽命。

    圖 12:ACE Excel色譜柱在耐用性方面有良好的口碑


    將2.1×100mm ACE Excel C18 UHPLC色譜柱在平均1,000 bar(14,500 psi)壓力下進行2000多個梯度的運行。

    在該穩定性研究結束時,柱效(塔板數)和保留時間基本保持不變。

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