一、H-90°脈沖的測試
在測試時,使原子核的磁化矢量翻轉90°的脈沖寬度,這時得到的信號最強。測試前先設定照射功率,才能確定90°的脈沖寬度,改變照射功率,90°的脈沖寬度也會改變。
我們測定一系列脈沖寬度的圖譜,其中得到峰最強的脈沖寬度即為90°脈沖,但是最強峰不明顯,所以測180脈沖寬度,這時峰強為0,180°脈沖值的一半即為90°脈沖。
1H-90°脈沖的測試見圖一。
圖一 1H-90°脈沖的測試
二、二維譜( two dimensional spectroscopy)的測試
我們把核磁共振氫譜和碳譜稱為一維譜,是指譜上的橫坐標是頻率維,而縱坐標是強度,二維譜的橫坐標和縱坐標都是頓率維。
二維譜測試前先測好一維譜,如果是HH二維譜則先測氫譜,如果是CH二維譜則先測好氫譜和碳譜。然后選好相應的脈沖序列。
設定所用參數,根據一維譜設置二維譜范圍,設定f2軸(橫軸)譜累加次數,設定門軸(縱軸)譜所用數據點(最少64個)
采樣后選取相應的窗函數,第二次傅里葉變換得到結果二維譜的峰是在兩個頻率維平面上的柱狀立體峰(圖二),我們看到的譜是選取其橫切面得到類似等高線的平面圖,所以要選取橫切面。
圖二 二維譜的立體圖
H-H二維相關譜還可以進行對稱處理,去掉不對稱的噪聲峰。還可以進行噪聲處理,去掉T1噪聲峰(縱方向)和T2噪聲峰(橫方向)和進行傾斜處理,在做2DJ偶合譜時,偶合峰可能是傾斜的,進行傾斜處理后可成為垂直的。
三、操作注意事項
在儀器的維護和操作過程中一定要注意以下安全須知。必須遵守說明書中提及的須知。
1)裝有心臟起搏器及金屬假肢的人必須遠離磁體(至少4~6m),因為強磁場會使起搏器工作失靈,危及生命安全。
2)金屬物體應放在2m以外的地方,因為金屬物體會干擾磁場,影響譜儀的正常工作。
3)不要私自拆卸或調整儀器,或修改計算機軟件。
4)不得在易燃氣體或有香水的環境中操作儀器。
5)不要將液氮或液氮濺到身體任何部位,以免被凍傷。
6)變溫試驗時不要在樣品的沸點或冰點工作。升溫試驗需注意,溫度不要超過氘代有機溶劑的沸點,否則溶液汽化,脹裂樣品管,污染探頭,損壞儀器。做低溫實驗時,溫度不要低于樣品溶液的冰點,否則樣品凝固,測不出譜圖。另外,在天氣比較潮濕做低溫實驗時,要考慮樣品管周圍溫度低,可能有水蒸氣在樣品管上凝結成水滴,甚至結冰,影響測試。
7)請將磁帶、信用卡及機械手表放在遠離磁體的地方。強磁場會使磁帶、信用卡消磁。機械手表磁化。
8)每周檢查一次液氮的存量,經常檢查液氦的存量,防止失超。
9)不要拿掉排氣管上安全閥。
10)千萬不要在液體探頭上使用高功率,以免損傷探頭。