實驗方法原理 肥大細胞的胞質中充滿許多粗大的水溶性、嗜堿性和異染性的顆粒,顆粒中含有多巴胺,組胺,肝素。5-羥色胺等活性物質。這些物質中含有多硫酸脂和硫酸黏多糖類,能與異染性染料結合,因此,用中性紅、美藍、甲苯胺藍等染料處理上皮組織均可將肥大細胞胞質中的水溶性、嗜堿性和異染性的顆粒顯示出來。
實驗材料 成年小鼠
試劑、試劑盒 A-F固定液甲苯胺藍染色液的冰醋酸分色液
儀器、耗材 顯微鏡解剖剪解剖鑷子廢舊針頭解剖盤載片蓋片
實驗步驟
1.小鼠皮下組織鋪片制作
(1)斷頸法處死小鼠
(2)解剖小鼠取結締組織
(3)將組織鋪于干凈的載玻片上,用廢舊針頭剝離組織,越薄越好,大小在0.5cm×0.5cm即可。
(4)自然晾干待用
2.甲苯胺藍染色顯示肥大細胞
(1)固定:取晾干的鋪片于A-F固定液中固定5min
(2)水洗:取固定后的鋪片于細水沖洗1min
(3)染色:將沖洗后的鋪片入0.5%甲苯胺藍染色液中染色30min
(4)水洗:取染色后的鋪片于細水沖洗2min
(5)分色:入1%的冰醋酸中數秒
(6)水洗:取分色后的鋪片于細水沖洗2min
(7)鏡檢:顯微鏡下觀察(脫水、透明、中性膠封片后效果更佳)