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  • 發布時間:2020-08-24 15:14 原文鏈接: 小鼠肥大細胞的形態學觀察實驗

    實驗方法原理 肥大細胞的胞質中充滿許多粗大的水溶性、嗜堿性和異染性的顆粒,顆粒中含有多巴胺,組胺,肝素。5-羥色胺等活性物質。這些物質中含有多硫酸脂和硫酸黏多糖類,能與異染性染料結合,因此,用中性紅、美藍、甲苯胺藍等染料處理上皮組織均可將肥大細胞胞質中的水溶性、嗜堿性和異染性的顆粒顯示出來。

    實驗材料 成年小鼠

    試劑、試劑盒 A-F固定液甲苯胺藍染色液的冰醋酸分色液

    儀器、耗材 顯微鏡解剖剪解剖鑷子廢舊針頭解剖盤載片蓋片

    實驗步驟

    1.小鼠皮下組織鋪片制作


    (1)斷頸法處死小鼠


    (2)解剖小鼠取結締組織


    (3)將組織鋪于干凈的載玻片上,用廢舊針頭剝離組織,越薄越好,大小在0.5cm×0.5cm即可。


    (4)自然晾干待用


    2.甲苯胺藍染色顯示肥大細胞


    (1)固定:取晾干的鋪片于A-F固定液中固定5min


    (2)水洗:取固定后的鋪片于細水沖洗1min


    (3)染色:將沖洗后的鋪片入0.5%甲苯胺藍染色液中染色30min


    (4)水洗:取染色后的鋪片于細水沖洗2min


    (5)分色:入1%的冰醋酸中數秒


    (6)水洗:取分色后的鋪片于細水沖洗2min


    (7)鏡檢:顯微鏡下觀察(脫水、透明、中性膠封片后效果更佳)


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