實驗材料 尸體
試劑、試劑盒 70%酒精來蘇兒新潔爾滅福爾馬林石碳酸甘油氨水麝香草酚
儀器、耗材 解剖器吊桶注射器針頭Y形玻璃管注射導管橡皮管橡皮手套隔離衣口罩長筒膠鞋塑料登記牌線
實驗步驟
一、尸體登記
尸體處理前須按照政府有關規定進行登記,應有專用的登記本或登記卡。對無主認領的尸體,尚需拍照備查。登記內容應包括下列項目:編號、姓名、性別、年齡、籍貫、來源、死因、死后時間(估計到灌注時止)、尸體外形特征(有無殘疾、畸形、外傷等)、防腐注射部位、防腐劑配方及灌注量、灌注日期、灌注人員姓名、保存方法、領用單位、日期及經手人。
登記后,每具尸體在耳垂和踝部分別系綁編號牌,編號牌可選用耐酸堿、不易腐蝕的塑料片,亦可選用布條。為避免日久霉爛脫落辨認不清,塑料片的號碼可用有機溶劑加油畫顏料書寫,布條可用碳素墨水書寫好后用酒精浸濕曬干,便能長期保存不會脫色。
二、尸體的清洗和消毒
處理尸體之前,工作人員應穿戴隔離衣、帽、口罩、橡皮手套和長筒膠鞋。注意避免傳染病及其中間宿主媒介的感染。尸體先用自來水沖洗,同時用軟毛刷洗干凈,然后用消毒劑噴灑。消毒劑一般用3%~5%的來蘇兒(lysol)或0.1%~0.2%的新潔爾滅或70%~75%的酒精。消毒后最好再剃去頭發和陰毛。
尸體的清洗、消毒和灌注應在尸庫附近的處理室或實驗室的尸體解剖室進行,禁忌在其他場所處理。尸體處理完畢后,對工作場地和使用過的衣物及用具均需清洗消毒。對死者的衣物應及時進行焚燒處理。
三、尸體的防腐固定
人或動物死后,尸體若未經防腐固定處理,很快就會發生組織自溶、腐敗、逐漸解體,產生多種胺、吲哚、甲基吲哚、硫化氫等有強烈臭味的毒性產物。防腐固定的原理,主要是使蛋白質變性凝固。組織腐敗和自溶要有酶參加,而酶的本質是蛋白質,細菌也是由蛋白質構成的。因此,凡能使蛋白質變性或凝固的物理、化學因素,均能使酶失去催化活性,抑制或殺滅細菌,以防止組織腐敗、自溶,達到尸體防腐固定的目的。常用的化學防腐劑如酚類、醇類、醛類、重金屬鹽或物理性的加熱、紫外線、干燥脫水等,均有防腐固定作用。在尸體防腐固定和保存工作中,多采用化學防腐劑。
四、常用防腐固定劑配方
(一)單一的防腐固定劑
固定尸體標本多采用甲醛溶液作為單一的防腐固定劑。甲醛化學結構式為HCHO,其35%~40%飽和水溶液的商品名通常稱為福爾馬林(formalin )或甲醛溶液。固定尸體的常用濃度為10%的福爾馬林,亦即4%甲醛。用福爾馬林灌注的尸體,約7d可滲人全身各部,但要達到較完全的固定以適于解剖操作的程度,則需120~180 d左右。
福爾馬林有價格低廉、殺菌能力強、防腐固定效果好等優點,故較常用。其缺點是用福爾馬林固定的標本組織容易變硬、發脆、刺激性強等。
(二)混合防腐固定劑
混合防腐固定液的配方很多,各有利弊。混合配方,增減藥物的原則是根據需要充分發揮各種藥物的長處,克服其缺點,避免發生不良的化學反應。這里介紹一些常用配方,僅供參考。
1. 含甲醛的混合防腐固定劑
含甲醛的固定劑都有刺激性氣味,利用甲醛與氨水混合生成環六亞甲基四胺(烏洛托品),可降低甲醛的刺激性和毒性,其配方如下:
配制時,先將福爾馬林加水稀釋,然后加入氨水。加氨水后有放熱反應,溫度升高,待其冷卻后,再加入酒精和麝香草酚。
2. 不含甲醛的混合防腐固定劑
不含甲醛的混合液一般沒有很強的刺激氣味,尸體也較柔軟,但防腐固定的效果較差。
五、尸體的防腐固定處理方法
尸體防腐固定方法,有浸泡法和灌注法兩種。浸泡法是將標本浸泡于防腐液中。藥物滲入器官內部,以達到防腐固定目的。由于直接滲透只能達到一定深度,因而只適合于小件離體器官,整體防腐保存則常用灌注法,把防腐固定藥物注入血管,使之循血管流遍全身,滲透到全部組織器官中。
1. 灌注部位的選擇 成人尸體灌注部位應選擇在損壞結構較少的部位,容易暴露的表淺動脈.如撓動脈、股動脈、頸總動脈、肱動脈或足背動脈。童尸因四肢動脈細小,操作較困難.多選用頸動脈。嬰尸因尸體較小,皮下脂肪多,在四肢或頸部灌注均不相宜,如果臍帶尚存,可用大號注射器經臍靜脈灌注;如果臍帶已脫落。可將防腐液注入胸、腹腔內,然后再放入尸體槽內浸泡于防腐液中。
2. 灌注方法動脈加壓灌注多采用吊桶灌注法。制備一個能容納10 000 ~20 000 ml的吊桶。桶的下部裝有出水管,桶的側面設置有能指示液量的標尺。使用時,將桶懸吊于約2m處(利用不同的高度,可以調節壓力大小)。再用橡皮膠管與Y形管和灌注導管相連。這種裝置設備和操作都較簡便,壓力均勻,容易控制(圖15)。
灌注時,可按動脈的體表位置,劃定縱行切口,切口長約4 cm,切透皮膚后,用鈍剝離法找出動脈,縱行切開動脈圖22吊桶灌注法壁。灌注膠管的遠端用Y形管連接兩個注射導管(金屬的、玻璃的或塑料的均可),導管的末端最好制成壺腹形,便于結扎,不易滑脫(也可連接兩個注射器頭)。兩個導管或針頭分別向遠側和近側插入動脈切口,以便同時向遠、近兩個方向灌注。
尸體灌注后,形態位置便基本定型,特別是兩手握拳狀收縮后,很難矯正,不便解剖操作:故灌注時就應注意按解剖學位置將尸體擺好,即:尸體仰臥,頭放正,上肢伸直,手掌朝上,手指伸直,兩下肢伸直并分開約30度,特別要注意使手指伸直,避免卷縮。為了防止手指彎縮,可在手掌和手指部擱物加壓。
3. 防腐液的灌注量灌注量應根據尸體的情況及不同的固定液來決定,一般為體重的20%左右。有些尸體可能肺部有空洞或其他原因,在灌注過程中,從口鼻外淌的藥液較多,堵塞又無效時,可適當降低吊桶高度,減壓灌注或行間歇性灌注。灌注到什么程度才算達到要求,可按以下方法來斷定:當灌注達到要求時,皮下呈現水腫,用手按壓有堅實的彈性感,胸腹飽滿,口鼻涌出泡沫性藥液;如果防腐液內有石碳酸成分,則防腐液已達到的皮膚區會出現白色斑點,并向四周擴展。以上現象可作為灌注已達到要求的標志。
如果灌注后認為某些局部還達不到灌注要求時,可用灌注吊桶的針頭直接插入所需部位作局部補注,也可用注射器對局部直接補充注射。尸體灌注完畢,應擱置1~2 d,讓動脈內的防腐液滲入組織間隙后,再移入尸池浸泡。
六、尸體的保存
尸體經防腐固定處理后,還要有妥善的保存措施,以避免水分蒸發、尸體干枯僵硬、表面霉爛等。尸體保存方法很多,現僅介紹常用的保存方法。
(一)濕保存
濕保存是將尸體浸泡在盛有保存液的尸槽、尸箱或尸池中。此方法設備簡單,成本較低,效果良好。防腐固定藥物可單獨或混合用作保存液,藥效可靠,是常用的保存液。
1. 甲醛溶液常用5%的福爾馬林溶液。為了降低甲醛的刺激性氣味和毒性,可采用灌注氨水的方法來改善教學環境。其方法是向固定尸體的動脈內灌注25%的氨水1000ml,胸腔、腹腔、盆腔各注入200ml。
2. 苯酚溶液常用濃度為2%~3%的苯酚。苯酚溶液防腐抗霉效果好,刺激性氣味小,但對固定周圍神經末梢有損害作用,時間久了,尸池內會有黃褐色泥漿狀沉淀物。
3. PM防霉防腐液PM 是2-砒碇基-氧化物異硫脲氫溴酸鹽(2-pyridyl-n-oxide iso-thiourea hydrobromide)的簡稱。PM為淺灰色或奶黃色結晶或結晶性粉末,155-158℃分解,溶于水,微溶于甲醇、乙醇。具有抗菌譜廣、抗菌力強、防腐防菌效果好、刺激性小、毒性弱、水溶性好等優點。常以0.05%的PM加10%的酒精配置的保存液來保存尸體,防霉防腐效果好。該保存液清澈,價格適中,是一種新的比較理想的尸體保存液。
濕保存的尸體要定期檢查,每年至少兩次。檢查時應注意尸體外露部分是否腐爛,液面是否有霉塊。若發現尸體有腐爛或液面有霉塊,要及時采取措施,更換或補充藥液。
(二)塑料袋干保存
經防腐固定的尸體,在尸池中浸泡30~90 d,使表面固定后,取出放入大小適合的塑料袋內,袋內留有少量含福爾馬林或苯酚的保存液,密封袋口,放在架子上貯藏。