實驗方法原理 在試劑帶上沒有葡萄糖氧化酶(GOD)過氧化物酶(POD)色素原及弱酸性緩沖液所組成的反應試劑以及作為基底顏色的藍或黃色色素,把這種試帶浸入尿中,如尿內含葡萄糖,因葡萄糖氧化酶(GOD)作用,葡萄糖被氧化為葡萄糖醛酸和過氧化氫(H2O2)H2O2在過氧化物酶(POD)的作用下放出新生態氧把色素原氧化而顯色,指示反應如下:
葡萄糖 +O2(來自空氣==葡萄糖酸十2H2O,
色素原(無色)十H2O2→氧化型色素(顯色)+2H2O所用的色素原常用者為被氧化成藍色的鄰甲苯胺,而有的則用碳化鉀,后者被氧化成褐色的游離碘.
實驗操作:將試帶浸入尿中,5秒后取出,在自然光線下與標準色板比較。判定結束,若顏色不變為陰性,若色素為鄰用苯胺,顯藍色為陽性。若色素為碘
化鉀顯褐色為陽性.
實驗步驟
葡萄糖氧化酶法:原理同葡萄糖氧化酶試帶法.
實驗操作:測定時先將酶酚混合,試劑在37℃水浴箱中預熱10分鐘.并將尿液標本稀釋10倍,再按表操作
葡萄糖氧化酶比色法操作步驟
測之管 標準管 空白管
稀釋后尿液 20微升 - -
葡萄糖標準液 - 20微升 -
酶酚混合試劑 4ml 4ml 4ml
混合后在37℃水浴箱中保溫5分鐘,用空白管調零,在500nm波長處比色.
計算:葡萄糖(20mol/L)=(測定管吸光度/標準管吸光度)×5.55
實驗報告:晨尿(或隨機尿)標本:葡萄法×2umol/L
注意事項
一、 葡萄糖氧化酶試帶法
1、此法的靈敏度250mg/L,而對葡萄糖有高度的特異性,對其他糖類均不起反應.
2、注意試帶的酶促反應時間,按規定時間與標準板比色試劑保存時不能將其暴露于空氣中和陽光下,也不得與煤氣接觸,應保存于陰涼干燥處,有效期多為半年.
3、若服用大量維生素C和應用汞類利尿劑等藥物,可呈似陰性反應.為了消除維生素C的抑制反應、患者試驗前,至少須停用維生素C在24h以上,一般停用維生素C 3天.
二、尿糖定量檢查
1、正確執行尿標本的稀釋和吸取技術,所用容器必須經過校正.
2、其他注意事項與葡萄糖氧化酶試帶法相同.