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  • 發布時間:2020-08-17 17:09 原文鏈接: 帕金森病模型的制作

    實驗方法原理 帕金森病(Parkinson disease, PD)是中老年常見的基底節神經元進行性退行性疾病,主要累及黑質和紋狀體多巴胺遞質系統。6-脛基多巴胺(6-0HDA)和1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶(MPTP)是兩種主要的多巴胺能神經毒性物質,可以很好的模擬PD患者的臨床表現和病理改變。由于6-OHDA不能通過血腦屏障,需立體定向注入腦內,目前多采用黑質致密部(SNc)、紋狀體(cs)、中腦腹側被蓋區(VTA)、前腦內側束(MFB)等部位進行注射;MPTP有高度的親脂性,易通過血腦屏障,選擇性濃集于黑質,通常經腹腔或皮下注射。

    實驗材料 雄性SD大鼠 體重200-250g雄性C57 BL小鼠 體重20-25g

    試劑、試劑盒 6-OHDA和MPTP(Sigma公司)

    儀器、耗材 立體定位儀(NarishigeJAPAN)顱骨鉆吸引器1μL或5μL微扯注射器


    實驗步驟

    1.6-OHDA致大鼠PD模型的制作:


    (1)SD大鼠稱重,按每籠5-6只飼養。在實驗設計的時間點,將大鼠以1%戊巴比妥鈉麻醉,待動物失去知覺即可開始操作。


    (2)大鼠用立體定位儀將雙耳及門齒固定。自矢狀縫皮膚劃開,棉球止血,定位,鉆孔,挑破腦膜(以黑質致密部單側損毀為例,參照Paxinos圖譜確定注射坐標,前顱后5.2mm,左側或右側旁開2.2mm,進針深7.8mm)。


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