常用抗體的應用范圍及選用（二）

2.單克隆小鼠抗人上皮細胞膜抗原 (Monoclonal mose anti human epithelial memberance antigen,EMA)
上皮細胞膜抗原是上皮細胞表面大分子糖蛋白物質，它不僅存在于各種上皮，以及各種上皮來源的腫瘤，也可存在于部分非上皮及其來源的腫瘤，如漿細胞，組織細胞等。
應用EMA來檢測正常的組織時，其陽性表達主要在細胞膜上，但在檢測腫瘤時，這種陽性物不僅在細胞膜上出現，也可在細胞漿中見到。實驗中發現，腫瘤細胞在分化增生時，陽性物表達強陽性。當腫瘤細胞趨于成熟或已成熟時，陽性物表達較弱，腫瘤細胞未分化時，抗原表達呈陰性。
EMA在檢測上皮組織及其來源的腫瘤組織時，抗原表達陽性，在檢測非上皮來源的腫瘤如漿細胞瘤，滑膜內瘤，上皮樣內瘤，平滑肌內瘤，神經鞘瘤，及來惡性神經鞘瘤時，抗原也可表達為部分陽性。因此認為：EMA不是上皮性來源腫瘤所特有的標記物，它的特異性不高。
該 抗體適用范圍廣，適合于各種類型的切片，應用真空負壓LSAB法檢測時，稀釋度在1：100。
3.癌胚抗原(Carcinombryonic antigen ,CEA)
自1965年Gotel等從結腸癌分離出一種腫瘤的相關抗原后，經過進一步的研究后發現，它存在于胎兒的腸里，由于人們將其稱為癌胚抗原。在實際應用中，CEA是一種廣譜的標記物。經實驗證明，它對胃癌，腸癌，肺癌，乳腺癌，胰腺癌，子宮頸癌，子宮體腺癌，卵巢癌，皮膚鱗狀細胞癌，膀胱移行上皮癌，食道癌等，抗原表達陽性，在上述的同類組織及癌旁類性組織，也可見到陽性物，有文獻報導，用CEA標記滑膜內瘤，間皮瘤，上皮樣內瘤和腦膜瘤，也可表達陽性。
目前，CEA有兩種產品，一是單克隆抗體，另一是多克隆抗體。
①單克隆小鼠抗 人CEA，克隆為A5B7。
該抗體的特點，純度高，雜質含量少，很少引起非特異性染色，同時，也不與含糖蛋白的物質起反應，因此，背景清晰干凈。
該抗體可檢測上述的病種及其來源的組織，適用于各種切片的染色。稀釋度為1：100。
②兔抗人CEA。該抗體為多克隆抗體，純度不如①號抗體，檢測及適應與①號抗體相同，但效果不如①號抗體，且較容易產生背景。稀釋度在1：300。
4.山羊抗人甲胎蛋白(Goat anti human alphafeloprotein,AFP)
AFP主要由胎兒肝細胞和卵黃細胞產生的一種酸性糖蛋白少量由胎兒的胸腺、肺、胃、腸道的細胞產生。AFP也不是一種肝癌特有的標記物。初用時把AFP作為原發性肝癌的一項特異性診斷指標。隨著免疫組化的深入開展和研究的深入進行，實驗結果證明：AFP的升高不僅在原發性肝細胞癌的病例，在生殖細胞腫瘤卵黃瘤和睪丸胚胎癌的病例也可大量見到。
用AFP檢測后顯示陽性的病例有：原發性肝細胞癌，胃癌，卵黃 瘤和睪丸胚胎癌等。其陽性 表達部位主要在細胞漿，也有少量在細胞膜和細胞核上。
該抗體適合于各種切片的標記，可用任何一種 免疫 方法來進行染色，稀釋度為1：100-1：300。
上述四種類型的抗體可作為來源于上皮的腫瘤及其它來源的腫瘤的區別。只要損傷正確，抗體的質量沒問題，就可獲得滿意的結果。使用時應根據不同的組織，不同的形態結構，來選擇合適的抗體。當然有的腫瘤決不是用一兩種抗體就能夠把它們給予區分開來。因此，要根據不同的情況合理使用抗體，以便作出正確的診斷。
(二)常用的間葉源性組織及其腫瘤的檢測抗體
間葉源性組織范圍廣，內容多，它包括肌肉，纖維結締組織，脂肪，血管，周圍神經，骨，軟骨，淋巴等組織。由于這方面涉及的東西較多且較復雜，因而在上述方面所發生的腫瘤，是腫瘤病理學中最棘手和最疑難的問題之一。隨著免疫組化技術在腫瘤鑒別診斷中的應用，已經克服了許多以往無法克服或者難以克服的問題。當前，應用于這方面檢測的抗體越來越多，下面將介紹幾種常用的抗體：
1.波形蛋白(Vimentin ,Vim)
Vim是原始的中間絲，它存在于所有的間葉組織細胞中，可以向神經膠質，肌源性細胞和上皮細胞中間絲演變。Vim是一種單克隆抗體，臨床應用來作鑒別診斷的有：鑒別癌與內癌，前者陰性，后者陽性；鑒別小細胞性腫瘤，這時應多用幾種抗體，如CK，LCA和Vim，如為淋巴瘤，尤文氏瘤或神經母細胞瘤，Vim為陽性；鑒別黑色素瘤和低分化癌時，Vim陽性。
應用Vim檢測腫瘤陽性的有：HDR-S細胞，B免疫母細胞形淋巴瘤，漿細胞瘤，T 免疫母細胞及多形性T 淋巴瘤，平滑肌瘤和肉瘤，纖維瘤和肉瘤，脂肪瘤和肉瘤，橫紋肌肉瘤，血管瘤，粘液瘤，神經纖維瘤，鞘瘤，惡性神經鞘瘤，惡性纖維組織細胞瘤，纖維組織細胞瘤，惡性巨細胞瘤，間葉肉瘤，骨瘤和骨肉瘤，骨巨細胞瘤，軟骨細胞瘤，骨軟骨瘤，軟骨母細胞瘤，軟骨肉瘤，滑膜肉瘤，精原細胞瘤，黑色素瘤和惡性黑色素瘤，脊索瘤癌肉瘤，尤文 氏瘤，腦膜瘤，卵泡膜細胞瘤，顆顆細胞瘤，間皮瘤，等等。
在正常組織中，Vim標記陽性組織的有：
平滑肌和橫紋膠肌細胞，肺泡吞噬細胞，血管及內皮細胞，肝臟枯否氏細胞，滑膜細胞，漿細胞，奇形細胞，室管膜細胞，卵巢顆粒細胞，黑色素細胞等。
Vim是目前用來鑒別上皮性腫瘤還是間葉源性鐵常用抗體之一，不過，在應用于鑒別腫瘤時，應多選用幾種抗體。
Vim的抗體現市售的有幾種：
⑴單克隆小鼠抗Vim克隆3B4，該抗體稀釋度較高，可在1：200，它適用于各種切片，但在使用前必須抗原修復。
⑵克隆小鼠抗豬Vim，克隆V9，該抗體較早前使用，從已檢測的大量病例情況分析，該抗體效果不錯。但該抗體最大的缺點是稀釋度較不理想，僅在1：10左右，由于稀釋度不大，標記的例數較少，成本較高，現已較少使用。
⒉Von Willebrand因子。
這種抗體在舊叫法中被稱為第Ⅷ因子相關抗原，如今被 稱為Von Willebrand因子，它可在各種內皮細胞和巨核細胞的胞漿中找到，因此在臨床的應用中，它常被用來檢測由內皮細胞來源的各種腫瘤，同時也用來檢測骨髓標本中巨核細胞的增殖。該抗體使用前須做抗原修復。注意抗體有單抗 及多抗之分。
⒊CD34
該抗體被認為是一種穩定的，可靠的血管內皮細胞及其來源的腫瘤的標記物。它對毛細血管，小血管內皮細胞顯示強陽性，對中至大血管內皮細胞量選擇性陽性，對軟組織腫瘤，腫瘤 毛細血管，血管管和血管肉瘤的內皮細胞呈陽性，對淋巴管內皮陰性。使用時須做 抗原修復。
⒋CD31
該抗體與CD34的標記范圍基本一樣。