為確保臨床輸血安全,輸血前要用能夠檢測不完全抗體的方法篩查不規則抗體,本院從2004年6月起,運用微柱凝膠技術對需輸血的患者提前篩查不規則抗體,確保了輸血安全,保證了臨床治療的順利進行,現報告如下。
1 材料與方法
1. 1 試劑與儀器 抗球蛋白試劑、IgG抗D血清、不規則抗體篩查細胞均由上海血液中心供應;微柱凝膠工作測試系統由長春博迅公司提供。
1.2 標本來源 選擇本院2004年6月―2005年12月3 600例需輸血的住院患者,其中男2 000例,女1 600例;內科輸血1 303例,外科手術2 297例。
1.3 微柱凝膠試驗 向標示好Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的3個微柱凝膠管中加50μl備檢血清,再加50μl 0.5%相應篩檢紅細胞,置37℃孵育10min;取出置專用水平離心機離心5min,觀察結果:紅細胞全部沉于微柱底部者為陰性,聚于微柱上面者為陽性(將陽性血清再用間接抗球蛋白試驗確證)。
1.4 抗球蛋白試驗(試管法) 取5支標識好Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、陽性對照、陰性對照的試管,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ管加5%相應篩檢紅細胞2滴和被檢血清2滴,陽性對照管加5%Rh(D)陽性紅細胞和IgG抗D血清各2滴,陰性對照管加5% Rh(D)陽性紅細胞和AB型血清各2滴;各管37℃孵育1h后用生理鹽水洗滌3次,再加抗球蛋白試劑2滴,2 000r/min離心1min,觀察結果:當陽性對照管和被檢管出現凝集,而陰性對照管不凝集時,即為陽性,說明血清中有不規則抗體存在。
表1 9例不規則抗體篩查陽性血清與譜細胞反應的結果（略）
2 結果
用微柱凝膠試驗篩查不規則抗體,3 600例中有9例陽性,并經間接抗球蛋白試驗確證,其中男4例,女5例(表1)。用排除法并通過抗體特異性鑒定:1～3號患者血清中有抗D;4~7號患者血清中有抗E;8號患者血清中有抗c;9號患者血清中有抗e。經詢問4例男性均有輸血史(2例有抗E、1例有抗D、1例有抗c),2例女性只有輸血史(有抗E),2例女性只有妊娠史(均有抗D),1例女性既有輸血史又有妊娠史(1例有抗E、1例有抗e)。9名陽性不規則抗體者有5人為擇期手術患者:2例通過自身輸血順利完成手術;2例用微柱凝膠法配出相合懸浮紅細胞輸注。
3 討論
我們采用微柱凝膠試驗篩查不規則抗體,檢出率為0.25%(9/3 600),與美國0.3%～2.0%的報道相似,稍高于日本0.16%的報道［1］,并全部為抗球蛋白法所證實。微柱凝膠試驗簡便快速、靈敏度高［2］,結果穩定可靠容易判斷,標本用量少、易標準化,適用于臨床常規不規則抗體篩檢。須指出的是為不影響結果判斷該試驗要用新鮮血清標本。9例中7例有輸血史或妊娠史,提示此類患者輸血前作不規則抗體篩檢尤為重要。不規則抗體多為免疫性不完全抗體,可通過胎盤影響胎兒,妊娠婦女施行不規則抗體篩檢并鑒定抗體特性,可預測新生兒溶血病,為此本院已將不規則抗體篩檢列為產前血型血清學檢查常規項目。對手術受血者的不規則抗體篩查由于是在輸血前3d內進行,篩檢出陽性抗體者可以有充裕的時間鑒定其特異性,選擇相配合的血液輸注,一旦找不到相配合的血液,還可選擇自身輸血,因此可避免手術中患者急需輸血時沒有相合血液而措手不及。5例擇期手術患者均術后恢復良好,全部康復出院。對于連續輸血患者,有學者［3］主張3d篩檢1次,以防止開始效價很低不易檢出,但經過輸血刺激,回憶性抗體效價迅速升高而引起溶血反應。篩檢用譜細胞不可能包含所有抗原,對一些低頻率抗原相應抗體不能檢出,因此“不規則抗體篩查陰性”并不等于完全沒有不規則抗體;對ABO血型的誤判,也不能通過抗體篩查糾正查出。因此即使不規則抗體篩查陰性,還必須用能快速檢測出不完全抗體的方法交叉配血,以確保輸血萬無一失。
4 參考文獻
［1］ 孔令宜.紅細胞檢查［M］//孔令宜,馬三科,馬長仁,等.成份輸血與臨床應用.沈陽:遼寧科技出版社,1994:369-429
［2］ 李沙,鄭山根,歐陽錫林,等.柱凝集技術不規則抗體的初步觀察［J］.中國輸血雜志,1999,12(3):168
［3］ 胡永紅,李勇.抗體檢測和鑒定［M］//李勇,楊貴貞.人類紅細胞血型學實用理論與實驗技術.北京:中國科學技術出版社,1999：139-157
473009 河南省南陽市中心醫院輸血科