微流控電阻抗技術檢測蜜蜂孢子

倘若地球上的蜜蜂消失了，人類或要消失？這句話不是小編說的，是下圖這個老頭兒說的。小編也絕沒有要危言聳聽的意思。

這個老頭兒在他的絕密手記上是這么說的：人類有可能在2060年滅絕；倘若地球上的蜜蜂全部消失了，人類或許也要消失了，甚至有可能只剩下不到4年的時間。

好吧，說什么我都不相信他說的2060年人類就滅絕的事情。不過認真地說，如果沒有蜜蜂授粉，地球上的萬物應該都會受到影響吧。難道要靠蒼蠅么？

內生孢子又稱芽孢，主要來源于寄生在昆蟲的消化道上皮細胞中的微孢子蟲，典型的有蜜蜂腸道微孢子蟲和家蠶微孢子蟲。微孢子蟲病感染傳播速度快，易出現群體體質衰弱甚至死亡，因此需要對昆蟲腸道中的內生孢子進行檢測，以達到對微孢子蟲病的防控和判斷最佳治療期。

目前，實驗室對于蜜蜂腸道內生孢子的計數只能通過顯微鏡計數，其過程費時費力，且蜜蜂腸道內生孢子粒徑較小，僅2_~3μm，不同人員間鏡檢結果偏差較大，且濃度偏高時鏡檢尤其困難。卓微科技定制版JIMBIO CL 細胞計數儀可替代顯微鏡鏡檢，檢測濃度范圍為1e5~5e6，能夠提高計數效率，給出準確客觀的計數結果。

下面是整個蜜蜂腸道內生孢子的計數案例

材料：

感染微孢子蟲病蜜蜂 、PBS（1X）

孢子懸液純化制備：

1、取蜜蜂的腹部，置于放入蒸餾水及研磨粉的研缽中研磨。

2、研磨均勻后轉入10ml離心管中，500rpm低速離心3min。

3、上清轉入新的10ml離心管，棄沉淀，2000rpm高速離心10min。

4、棄上清，用清水重新懸浮沉淀，4000rpm離心10min。

5、取沉淀，用1mlPBS溶解沉淀，4℃保存備用。

顯微鏡鏡檢圖：

結果與分析：

從圖1、圖2可以看出，蜜蜂腸道內生孢子比較小，且濃度較高的時候，樣本平鋪在血球計數板上非常密集，顯微鏡下計數困難。

從表1中可以看出，定制版JIMBIO-CL測試結果與計數板統計相比，平均濃度基本一致，由于定制版JIMBIO-CL為10微升樣本全計數，測試結果波動較小，穩定性明顯優于進口血球計數板。

注意事項：

1、只能使用PBS（1X）稀釋待測蜜蜂孢子樣本；

2、加樣前需充分混勻待測樣本（可根據樣本總量選擇不同規格液槍吹打）；

3、為保證檢測結果的穩定性，待檢測樣本總量不要低于100微升。