成分
蛋白胨 1g
氯化鈉 5g
葡萄糖 1g
磷酸二氫鉀 2g
0.4%酚紅溶液 3mL
瓊脂 20g
蒸餾水 1000mL
20%尿素溶液 100mL
pH7.2±0.1
制法
將除尿素和瓊脂以外的成分配好，并校正pH，加入瓊脂，加熱溶化并分裝燒瓶。121℃高壓滅菌15min。冷至50～55℃，加入經除菌過濾的尿素溶液。尿素的最終濃度為2%，最終pH應為7.2±0.1。分裝于滅菌試管內，放成斜面備用。
試驗方法
挑取瓊脂培養物接種，在36±1℃培養24h，觀察結果。尿素酶陽性者由于產堿而使培養基變為紅色。