實驗概要
目的DNA片段的回收技術是重組DNA中的關鍵技術，回收是指從電泳介質中純化出目的片斷。目前待回收的片斷主要有酶切片斷和各種PCR片斷；回收的介質主要有瓊脂糖和PAGE；回收的方法主要有樹脂回收、微量柱回收、玻璃奶回收、液氮凍凍融回收及透析袋大量回收等，下面分別介紹樹脂、微量柱及液氮凍凍融回收技術。本方法具有操作簡單的特點，特別適合于PCR片段、酶切片段等的回收。
主要試劑
PCR片斷純化試劑盒 80％異丙醇 微量柱
主要設備
離心機 電泳議 電泳槽 取液器 微量真空裝置 抽濾裝置
實驗步驟
1. 紫外燈下從膠上切下目的片段，放入一Epphendof管中。
2. 離心管在－20℃冷卻5－10分鐘。
3. 將微量柱下套上一Epphendof管，將冷卻的膠條裝進微量柱中，4℃ 12000rpm離心10分鐘。
4. 棄微量柱，用酚/氯仿、氯仿抽提Epphendof管中液體各一次。
5. 1/10體積乙酸鈉＋2體積無水乙醇沉淀2小時。
6. 70％乙醇洗沉淀，真空干燥，復溶于dd水或TE中。