在Western Bloting實驗中，在遇到總蛋白濃度測定不準確時候，或者蛋白質樣品在電泳前上樣時產生的樣品間的操作存在誤差；這些誤差可以通過測定每個樣品中實際轉到膜上的內參,比如內參GAPDH的含量來進行校正。
GAPDH（甘油醛-3-磷酸脫氫酶）是參與糖酵解的一種關鍵酶，由4個30-40kDa的亞基組成，分子量146kDa，檢測條帶大約在36kDa。 GAPDH基因幾乎在所有組織中都高水表達，廣泛用作Western blot蛋白質標準化的內參。
如何選擇合適的GAPDH抗體？
內參抗體雖然選擇較多，但是也需要遵循一定的原則，并契合實際的應用要求。首先，我們需要考慮目的蛋白的大小，我們推薦內參要與檢測的目的蛋白的分 子量最好相差5KD以上，因此你需要根據你目的檢測蛋白的分子量來選擇合適的內參，由于GAPDH的檢測分子量大約在36kD，因此該內參抗體不是很適合用于檢測30kD-40kD大小目標蛋白的WB實驗中。另外，不同的組織來源的樣本在選擇內參時還有一定的區別。比如某些細胞中，由于組織缺氧、糖尿病等因素會導致GAPDH的表達增高，不適合做內參。
另外，我們還需要考慮自己的需要，特別是實驗應用上的需要。一般來說，應用類型越多，在使用過程中的選擇余地就越大，而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩定性以及效價都要優于多克隆抗體。 另外，抗體的效價也是考察該抗體性價比的重要方面，也即相當于實際應用時的稀釋比率。一個效價高的100μl GAPDH抗體（假如其WB檢測的稀釋比率是1:5000，最終使用液相當于500ml），要比效價低的1ml的GAPDH抗體（假如 WB檢測的稀釋比率是 1:200，最終使用液相當于2ml）性價比更高。因此在選擇抗體的時候，不但需要考慮抗體的量，還需要考慮抗體的效價，即不同應用的建議稀釋比率。